轉(zhuǎn)錄因子Pax2在食管癌中的表達及功能研究.pdf

1、第一部分:Pax2在食管鱗癌中的表達及臨床意義
　　目的：研究Pax2在食管鱗癌組織、對應(yīng)癌旁組織及正常食管組織中蛋白的表達，并探討其與食管鱗癌臨床病理特征的關(guān)系。
　　方法：運用免疫組織化學(xué)法檢測104例食管鱗癌組織，53例對應(yīng)癌旁組織及14例正常食管組織中Pax2蛋白表達水平，并觀察其與食管鱗癌患者年齡、性別、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及淋巴管浸潤的關(guān)系。
　　結(jié)果：食管鱗癌組織Pax2蛋白表達水平顯著高

2、于對應(yīng)癌旁組織及正常食管組織（U=36.595，P＜0.0001）。并且ESCC組織中Pax2蛋白表達水平分別高于癌旁及正常食管粘膜組織（U=1261.5，P＜0.0001; U=470，P=0.0283），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Pax2蛋白表達與TNM分期相關(guān)(x2=10.200，P=0.017)，Pax2表達水平在37例TNMⅢ和Ⅳ期患者中明顯高于67例Ⅰ和Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（U=1611.0，P=0.01），而與患者年齡、性別

3、、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管浸潤無明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論： Pax2在食管鱗癌組織中的表達明顯高于對應(yīng)癌旁組織及正常食管組織，且與TNM分期有相關(guān)性。
　　第二部分:Pax2在食管癌中的功能研究
　　目的：在TE-1及ECA-109細(xì)胞株中，通過過表達或沉默Pax2基因，分析Pax2對食管癌細(xì)胞增殖、遷移能力的影響，并建立裸鼠皮下荷瘤模型，分析Pax2在裸鼠體內(nèi)對食管癌生長的影響。
　　方法：對于轉(zhuǎn)染Pax

4、2過表達和基因沉默質(zhì)粒的TE-1及ECA-109細(xì)胞株，采用MTT實驗、劃痕實驗分別測定細(xì)胞的生長率及遷移能力。各組細(xì)胞經(jīng)轉(zhuǎn)染后計算并評估Pax2對食管癌細(xì)胞生長增殖的影響。進行劃痕實驗，以確定Pax2對食管癌細(xì)胞遷移能力的影響。將生長4周的雌性裸鼠注射TE-1食管癌細(xì)胞株后，采用瘤內(nèi)注射法，將pcDNA3.1、pcDNA3.1-Pax2的質(zhì)粒脂質(zhì)體復(fù)合物注射至瘤體。
　　結(jié)果： pcDNA3.1-Pax2轉(zhuǎn)染可抑制食管癌細(xì)胞的生

5、長，siRNA-Pax2轉(zhuǎn)染可促進食管癌細(xì)胞增殖。轉(zhuǎn)染pcDNA3.1和pcDNA3.1-Pax2的TE-1、ECA-109細(xì)胞，均無明顯細(xì)胞遷移。動物實驗結(jié)果顯示，采用pcDNA3.1-Pax2干預(yù)的裸鼠腫瘤體積明顯大于pcDNA3.1干預(yù)的裸鼠瘤體積(P=0.012)。
　　結(jié)論：在體外，Pax2過表達可抑制食管癌細(xì)胞增殖，Pax2基因沉默可促進食管癌細(xì)胞增殖。Pax2基因過表達對于食管癌細(xì)胞遷移能力無明顯影響。動物模型上，過