松弛素樣因子在大鼠卵巢中的表達(dá)及調(diào)節(jié).pdf

1、本課題為黑龍江省博士后啟動(dòng)基金資助課題(NO.2003)。目的是研究松弛素樣因子(relaxin-likefactor，RLF)在大鼠卵巢不同功能階段中的表達(dá)趨勢(shì)及影響RLFmRNA表達(dá)的可能機(jī)制，初步探討RLF在雌性生殖方面的生理作用。 本實(shí)驗(yàn)分兩部分：在體實(shí)驗(yàn)部分：采用RT-PCR方法，觀察①生長(zhǎng)期、②動(dòng)情周期、③假孕模型、④妊娠期大鼠卵巢中RLFmRNA的表達(dá)趨勢(shì)。 離體實(shí)驗(yàn)部分：采用RT-PCR方法，①觀察體外培

2、養(yǎng)的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞中RLFmRNA的表達(dá)：②研究血小板活化因子(plateletactivatingfactor，PAF)、FSH、forscolin、PMA對(duì)顆粒細(xì)胞中RLFmRNA表達(dá)的調(diào)節(jié)；③研究PAF、hCG、forscolin、PMA對(duì)黃體細(xì)胞中RLFmRNA表達(dá)的調(diào)節(jié)；④用放射免疫方法同步觀察PAF對(duì)顆粒細(xì)胞雌二醇和黃體細(xì)胞孕酮分泌的影響。 在體實(shí)驗(yàn)結(jié)果：①在生長(zhǎng)期，大鼠隨著生長(zhǎng)發(fā)育，卵巢RLFmRNA的

3、表達(dá)逐漸增多，于青春前期達(dá)到峰值。②在動(dòng)情周期中大鼠卵巢RLFmRNA的表達(dá)呈周期性變化，于動(dòng)情前期和動(dòng)情期表達(dá)增強(qiáng)，動(dòng)情后期和動(dòng)情間期表達(dá)減弱。③假孕模型中，未發(fā)育卵泡、竇前期卵泡、排卵前卵泡及早期黃體RLFmRNA的表達(dá)呈現(xiàn)持續(xù)的高水平，在成熟黃體和退化黃體表達(dá)降低。排卵前期卵巢RLFmRNA水平逐漸增高，呈時(shí)間依從性，排卵時(shí)(即hCG刺激后12小時(shí))RLFmRNA水平降低，排卵后即早期黃體形成時(shí)RLFmRNA表達(dá)又增強(qiáng)。④RLFm

4、RNA在大鼠妊娠過程的表達(dá)比較復(fù)雜，妊娠第一天處于早期黃體，卵巢RLFmRNA高水平表達(dá)，妊娠第三天RLFmRNA水平最低，隨著妊娠的進(jìn)展，卵巢RLFmRNA的表達(dá)逐漸增加，至中期達(dá)到高水平，持續(xù)到妊娠后期。分娩前后RLFmRNA的水平出現(xiàn)波動(dòng)，臨近分娩RLFmRNA升高明顯。 離體實(shí)驗(yàn)結(jié)果：①RLFmRNA在體外培養(yǎng)的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞中均有表達(dá)；②顆粒細(xì)胞PAF、FSH、forscolin、PMA組RLFmRNA的表

5、達(dá)均較對(duì)照組增強(qiáng)(P＜0.05)；③黃體細(xì)胞PAF、forscolin、PMA組RLFmRNA的表達(dá)均較對(duì)照組增強(qiáng)(P＜0.05)，但hCG組無明顯變化；④PAF可明顯刺激離體培養(yǎng)的顆粒細(xì)胞雌二醇的分泌及黃體細(xì)胞孕酮的分泌(P＜0.05)。 結(jié)論：①RLFmRNA的表達(dá)可能與大鼠卵泡發(fā)育、排卵、黃體的形成和退化、妊娠的維持等雌性生殖的多個(gè)環(huán)節(jié)密切相關(guān)。②大鼠卵巢顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞中有RLFmRNA的表達(dá)，可能受PAF、FSH、P