禽呼腸孤病毒σ3蛋白基因的原核表達及重組蛋白抗原ELISA方法的建立.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩55頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、參考GeneBank上S1133株S1的基因序列，設計合成了一對含有酶切位點的引物，對ARV的S1133株的S1基因進行PCR擴增，擴增一段1014bp的基因片斷，然后克隆到表達載入PGEX-4T-1中。將重組質粒轉化到表達宿主菌，經終濃度為1mmol/L的IPTG誘導，高效表達了σ 3蛋白，融合蛋白的表達量占菌體總蛋白的25﹪。經Western-blot檢測表明，表達的融合蛋白能夠被ARV的陽性血清所識別，具有良好的抗原性。

2、利用表達的融合蛋白作為抗原，建立了檢測ARV抗體的間接ELISA方法，并對ELISA的反應條件進行了探索，確定了抗原的最適包被濃度為3.98 μ g/ml，檢測血清稀釋液為200倍稀釋，血清與抗原反應最佳反應時間為1.5小時，酶標二抗最佳作用時間為1小時，底物的最佳顯色時間為25分鐘。采用已確立的ELISA反應條件，檢測26份SPF雞的陰性血清，依據陰陽臨界值=陰性血清OD平均值+3SD，確定陰陽臨界值為0.4。用此方法檢測包被的抗原不

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論