人心臟和內(nèi)皮細(xì)胞中mir126的克隆和功能的初步研究.pdf

1、目的：克隆并發(fā)現(xiàn)人心血管高表達(dá)miRNA，分析其表達(dá)譜并尋找其靶基因，探尋其可能參與的心血管生理病理過(guò)程。 方法：構(gòu)建人心臟和內(nèi)皮細(xì)胞的miRNA文庫(kù)，運(yùn)用Northern Blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miRNA的表達(dá)譜。通過(guò)生物信息學(xué)以及分子生物學(xué)手段預(yù)測(cè)、分析新發(fā)現(xiàn)miRNA的來(lái)源和作用的靶基因。運(yùn)用基因芯片檢測(cè)過(guò)表達(dá)新發(fā)現(xiàn)miRNA的Hela細(xì)胞并高通量分析該miRNA可能調(diào)控的基因。 結(jié)果：克隆到數(shù)百個(gè)心血管

2、表達(dá)的miRNA，首次在人的組織和細(xì)胞中克隆到mir-126并證實(shí)其高表達(dá)于內(nèi)皮和心肌細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)mir-126來(lái)源于egfl7基因的第7個(gè)內(nèi)含子中并能通過(guò)宿主mRNA前體的剪切形成。發(fā)現(xiàn)VEGF是mir-126的靶基因，并且mir-126在乳腺癌組織中表達(dá)下調(diào)。此外，mir-126能夠下調(diào)AKT2基因同時(shí)能夠激活TNFAIP3和CXCL11的表達(dá)。 結(jié)論：Mir-126是一個(gè)心血管系統(tǒng)高表達(dá)miRNA并且在調(diào)節(jié)心肌代謝和血管新生