人肝癌血管內(nèi)皮細胞相關基因的篩選及功能的初步研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文人肝癌血管內(nèi)皮細胞相關基因的篩選及功能的初步研究姓名：鐘星申請學位級別：博士專業(yè)：免疫學指導教師：楊治華20040501中國協(xié)和醫(yī)科大學中國醫(yī)學科學院博士研究生學位論文內(nèi)皮細胞中低表達或不表達，從而證明了該基因是一個腫瘤血管內(nèi)皮細胞上調(diào)基因。采用反義核酸技術和RNA干擾技術分析HEC252基因在腫痛血管內(nèi)皮細胞中的作用，結果顯示抑制或阻斷該基因的表達，可抑制人肝癌血管內(nèi)皮細胞的增殖，抑制率可達70～80％，其

2、機制可能與誘導細胞凋亡和G2期阻滯有關；同時還能抑制血管網(wǎng)的形成。采用抗HEC252基因產(chǎn)物胞外區(qū)的抗體中和或封閉細胞膜表面HEC252基因產(chǎn)物，結果顯示該抗體可通過G2期阻滯抑制內(nèi)皮細胞的增殖和成管。這些結果在基因和蛋白水平上首次證明該新基因在人肝癌內(nèi)皮細胞的增殖、成管中起著重要作用。同時，采用RNA干擾技術在本文建立的人肝癌血管形成動物模型中分析了HEC252基因在體內(nèi)腫瘤組織中對入肝癌血管內(nèi)皮細胞及腫瘤新生血管形成的作用，結果表明

3、阻斷HEC252基因的表達能顯著地抑制人肝癌內(nèi)皮細胞在腫瘤組織中增殖和形成血管，從而有效地抑制腫瘤的生長，其抑制率可達7989％，在體內(nèi)證明了該基因在腫瘤內(nèi)皮細胞的增殖和形成血管中起重要作用。為了研究腫瘤血管內(nèi)皮細胞相關基因的體內(nèi)功能，科學地評價抗衄管形成藥物的療效，本文將人肝癌血管內(nèi)皮細胞分別與多種人腫瘤細胞混合后共接種于NODSCID小鼠，采用綠色熒光蛋白示蹤技術、免疫組化、血管密度計數(shù)及熒光顯微鏡觀察等方法證明了接種的人肝癌血管內(nèi)