肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的異質(zhì)性研究.pdf

1、指導(dǎo)小組成員名單孫惠川吳偉忠王魯朱小東主任醫(yī)師研究員主任醫(yī)師醫(yī)師基金資助：“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”科技重大專項(xiàng)(2008ZXl0002019／021)國家自然科學(xué)基金國際(地區(qū))合作與交流項(xiàng)目(81020108025)博士學(xué)位論文中文摘要中文摘要肝細(xì)胞癌(簡(jiǎn)稱“肝癌”)是世界上最常見的惡性腫瘤，是中國第二、全球第三的惡性腫瘤死亡原因。富血管作為肝癌的重要惡性特征之一，是肝癌侵襲與轉(zhuǎn)移的基本條件。抗血管生成治療可明顯抑制肝癌

2、進(jìn)展和延長患者生存，目前己成為治療晚期肝癌的主要治療方式之一。但是，抗血管生成治療的總體療效依然欠佳。由于血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面受體如VEGFR和FGFR等作為抗血管生成藥物的主要靶點(diǎn)在正常血管與組織細(xì)胞亦廣泛表達(dá)，抗血管生成藥物靶向作用缺乏針對(duì)腫瘤血管的特異性。這一方面影響了正常血管產(chǎn)生較多的副作用致使患者停藥，另一方面造成了脫靶效應(yīng)并可能促進(jìn)肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移，這些效應(yīng)都在一定程度上削弱了抗血管生成治療的療效。因此，研究肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的特

3、征及功能，尋找標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性指標(biāo)，精確靶向肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞，提高血管生成藥物療效，減少抗血管生成藥物的副作用，己成為當(dāng)前晚期肝癌治療的主要研究方向之一。既往血管內(nèi)皮細(xì)胞的研究主要是采用臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)或體外長期傳代的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(microvesselendothelialcell，MEC)或動(dòng)物模型中的血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行研究，不能體現(xiàn)肝癌患者本身肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的真實(shí)情況而有一定的局限性。本研究中，我們課題組通過

4、建立免疫磁珠分選血管內(nèi)皮細(xì)胞的技術(shù)平臺(tái)，利用兩種不同血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記手段，分別在肝癌患者配對(duì)的肝癌組織與癌旁正常肝組織中分選出兩種分子標(biāo)記的肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞(tumorderivedendothelialcells，TEC)及正常肝血管內(nèi)皮細(xì)胞(normalendothelialcells，NEC)。為分析和比較不同表型的TEC及NEC的血管源性特征及功能，我們對(duì)TEC和NEC進(jìn)行體外培養(yǎng)和傳代，觀察各自形態(tài)的差異，研究各自促血管生成的

5、功能及對(duì)抗血管生成藥物耐藥性的差異。我們通過基因表達(dá)譜芯片技術(shù)篩選出TEC與NEC之間功能差異的關(guān)鍵基因。我們以腫瘤細(xì)胞(Tumorcells，TC，腫瘤組織中去除CD3l陽性細(xì)胞后的細(xì)胞)和肝細(xì)胞(Notumorcells，NTC，肝組織中去除CD3l陽性細(xì)胞后的細(xì)胞)的基因表達(dá)譜作為參照，通過生物信息學(xué)的聚類分析及體內(nèi)外功能實(shí)驗(yàn)分析TEC的特征及來源，并探討其發(fā)生的可能分子機(jī)制，從而為抗血管生成藥物治療提供新的理論機(jī)制及尋找到新的治