卵巢癌血管內(nèi)皮細胞化療敏感性相關基因的篩選.pdf

1、背景與目的：卵巢癌是死亡率最高的女性生殖系統(tǒng)常見惡性腫瘤，約30％-40%的患者經(jīng)腫瘤細胞減滅術及多療程化療后仍有殘留腫瘤灶或腫瘤進展，且在獲得完全緩解的患者中，仍有半數(shù)以上在短期內(nèi)復發(fā)或轉(zhuǎn)移。因為腫瘤的化療敏感性不但與腫瘤細胞本身的化療敏感性相關，還與周圍血供狀態(tài)密不可分，本研究旨在探討卵巢癌血管內(nèi)皮細胞化療藥物處理后基因表達改變的情況，為調(diào)節(jié)卵巢癌的血管生成機制提供新的治療方法。
　　材料與方法：使用免疫磁珠從卵巢癌新鮮組織中

2、提取血管內(nèi)皮細胞，經(jīng)紫杉醇/卡鉑化療藥物處理后，使用寡核苷酸微陣列篩選差異表達的基因，并且經(jīng)實時定量 PCR方法及Western-blot擴大樣本驗證這些基因的變化與紫杉醇/鉑類化療療效的相關性。
　　結果：提取的卵巢癌血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)生長良好，融合后呈鋪路石樣改變，有接觸性抑制現(xiàn)象，經(jīng)免疫熒光鑒定證實其表達內(nèi)皮細胞特異性 vWF因子?；蛐酒夹g檢測顯示，經(jīng)紫杉醇/卡鉑處理后從4組樣本中共篩選出136個差異表達基因，其中57

3、個為上調(diào)基因、79個為下調(diào)基因。上調(diào)基因超過5倍的包括MMP-9, SPP1, LOX和 ESM1在內(nèi)的9個基因。下調(diào)基因包括HMGB1, FOS, CAPG, EGFL6, TMEM101, CXCL1和COL3A1在內(nèi)的7個基因。聚類分析顯示差異表達的基因主要包括與細胞外基質(zhì)功能、細胞周期調(diào)節(jié)、細胞黏附分子、MAPK信號通路、Toll-樣受體信號通路相關的基因。經(jīng)體外實驗：PCR技術及Western-blot，基因芯片檢測結果與PC