腺病毒攜帶PUMA基因增加耐藥絨癌化療敏感性的研究.pdf

1、目的：腫瘤耐藥與凋亡通路的異常有關(guān)，PUMA是p53下游的凋亡調(diào)控因子。本實(shí)驗(yàn)研究以腺病毒做載體攜帶PUMA基因(Ad-PUMA)對絨癌耐藥細(xì)胞jeg-3/vp16化療敏感性的影響。 方法：應(yīng)用MTT法檢測Ad-PUMA單獨(dú)以及與化療藥合用對絨癌親本細(xì)胞jeg-3和其耐藥細(xì)胞jeg-3/vp16增殖的影響，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和分子生物學(xué)方法探討其作用機(jī)制，并進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。 結(jié)果：5-Fu和Vpl6誘導(dǎo)jeg-3細(xì)胞凋亡的

2、過程中伴隨PUMA表達(dá)增強(qiáng)，jeg-3/vp16與jeg-3相比，PUMA表達(dá)降低，而且對化療藥物反應(yīng)減弱。Ad-PUMA促進(jìn)細(xì)胞凋亡，抑制絨癌細(xì)胞增殖，增加化療藥物誘導(dǎo)絨癌細(xì)胞凋亡的能力，增加細(xì)胞對化療藥物的敏感性，尤其在jeg-3/vp16細(xì)胞，10MOI Ad-PUMA與5-Fu，Vp16或MTX合用后，jeg-3/vp16對化療藥物的IC50分別下降了8.66，18.66和13.06倍。裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Ad-PUMA瘤內(nèi)

3、注射不但可以抑制絨癌jeg-3和jeg-3/vp16移植瘤生長，而且與Vp16合用后抑瘤效果顯著增強(qiáng)，尤其在對單獨(dú)應(yīng)用Vp16不敏感的耐藥腫瘤，Ad-PUMA與Vp16合用的抑瘤效果可以達(dá)到與在化療敏感的親本腫瘤相似的效果。 結(jié)論：PUMA在化療藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中發(fā)揮作用，其表達(dá)與細(xì)胞對化療藥物的敏感性有關(guān)。Ad-PUMA不僅誘導(dǎo)jeg-3和jeg-3/vp16凋亡，與化療藥物合用后，還顯著增加絨癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性，