DNA甲基化調(diào)控的microRNA所介導(dǎo)的腫瘤化療敏感性-肝癌5-FU化療敏感性之范例.pdf

1、如何克服腫瘤細(xì)胞原發(fā)性和繼發(fā)性耐藥對(duì)腫瘤化療療效的制約，對(duì)于臨床抗腫瘤化療實(shí)踐而言是一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。腫瘤化療失敗的主要原因是缺乏在給藥前對(duì)藥物有效性(即化療敏感性和/或化療副作用)進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估的手段。通過在基因或基因組水平上對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥的分子機(jī)制闡明，再結(jié)合相關(guān)的臨床治療驗(yàn)證，繼而發(fā)展出相關(guān)高效的診療手段，以期將可能的受益者從患者人群中篩選出來，是成功進(jìn)行個(gè)體化(或合理化)抗腫瘤化療的關(guān)鍵。
　　 肝細(xì)胞肝癌是一種進(jìn)展快且預(yù)后兇

2、險(xiǎn)的惡性腫瘤，尤以其對(duì)常規(guī)化療藥物的耐藥性高而惡名遠(yuǎn)揚(yáng)。我們通過對(duì)5-FU敏感性有百倍差異的兩種肝癌細(xì)胞系的DNA甲基化組學(xué)和microRNA(miR)基因組學(xué)的分析研究，發(fā)現(xiàn)了一批可能介導(dǎo)肝癌細(xì)胞5-FU抗性的miR候選基因。進(jìn)一步研究表明，miR-193a-3p在肝癌細(xì)胞對(duì)5-FU抗性中起著關(guān)鍵作用。miR-193a基因在QGY-7703中高度甲基化，miR-193a-3p低表達(dá)，QGY-7703細(xì)胞對(duì)5-FU敏感(IC50=0.3

3、9ug/ml)；在miR-193a基因去甲基化的SMMC-7721細(xì)胞中，miR-193a-3p高表達(dá)，SMMC-7721對(duì)5-FU不敏感(IC50=41.01ug/ml)。系統(tǒng)開展的細(xì)胞和裸鼠腫瘤模型水平上的實(shí)驗(yàn)表明，通過miR-193a-3p mimic轉(zhuǎn)染QGY-7703和antagomir轉(zhuǎn)染SMMC-7721逆轉(zhuǎn)了miR-193a-3p的水平，也逆轉(zhuǎn)了細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性及在裸鼠中的成瘤能力。siRNA介導(dǎo)的miR-193a

4、-3p靶基因-SFRS2(一種重要的mRNA剪切因子)的沉默可以再現(xiàn)mimic轉(zhuǎn)染QGY-7703所有的表型特征。
　　 我們的研究闡明了造成肝癌細(xì)胞對(duì)5-FU耐藥的一種新機(jī)制。這涉及到DNA甲基化調(diào)控miR-193a的表達(dá)，miR-193a-3p抑制SFRS2的表達(dá)和SFRS2調(diào)節(jié)Caspase2的促凋亡和抗凋亡兩種剪切形式的表達(dá)等多個(gè)環(huán)節(jié)。已開展了的臨床研究提示，SFRS2表達(dá)水平高低對(duì)肝癌的預(yù)后和5-FU化療敏感性的有一定