拉米夫定聯(lián)合原兒茶酸等中藥有效成分體外抗HBV作用研究.pdf

1、乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界性難題,不僅會造成急、慢性肝炎,而且與肝硬化和肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。全世界約有3.5億HBV慢性感染者,每年有50-120萬人死于HBV感染引起的疾病,其中死于肝癌的約為32萬。我國是HBV感染的高發(fā)區(qū),約60％的人群感染過HBV,10％的人群為HBsAg攜帶者,多達1.2億,現(xiàn)有乙型肝炎患者約為1200萬,乙肝給國家和人民造成了極大的危害。 目前用于抗HBV治療的抗病毒藥物主要有a.干擾素和以拉米

2、夫定為代表的核苷類似物,但由于藥物長期療效差、反跳率高、副作用等各種問題限制了臨床應(yīng)用。中藥在抗HBV的輔助治療、恢復(fù)肝功能、調(diào)整免疫功能以及抗肝纖維化方面都取得進展,占有一定優(yōu)勢,但是在解決乙肝的根本問題,即抗病毒治療方面尚無重大進展。單一藥物治療乙肝根本不能達到患者的理想狀態(tài),參考治療艾滋病的經(jīng)驗,人們推測合理的聯(lián)合藥物治療可以提高藥物療效,由于拉米夫定的諸多優(yōu)點,大多數(shù)聯(lián)合治療試驗均將其納入,加之中醫(yī)藥在治療中恢復(fù)肝功能、防止肝纖

3、維化、調(diào)整免疫機能等方面都有一定的優(yōu)勢,拉米夫定聯(lián)合中藥治療慢性乙型肝炎的思路已經(jīng)成為新的研究方向。 HepG2.2.15細胞是體外研究HBV復(fù)制較為理想的細胞感染模型。HepG2.2.15細胞是來源于HepG2細胞,整合了ayw型HBV全基因組,能夠部分模擬HBV的生活周期,表達各種HBV產(chǎn)物并能分泌HBV Dane顆粒的穩(wěn)定的人類肝癌細胞株,更接近于人體肝細胞內(nèi)環(huán)境的實際情況,被研究者廣泛應(yīng)用于HBV復(fù)制的研究.因此本實驗擬

4、應(yīng)用HepG2.2.15細胞模型體外研究拉米夫定分別與原兒茶酸(PA)、齊墩果酸(OA)、鞣花酸(EA)等中藥有效成份配伍使用,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及熒光定量PCR,通過檢測藥物組合對細胞培養(yǎng)上清中HBsAg、HBeAg濃度和HBV DNA的抑制作用,各組結(jié)果用平均值±標準差表示,組間比較用單因素方差分析,兩組間比較用t檢驗。 結(jié)果表明在3TC+PA聯(lián)合應(yīng)用可明顯增強對HBV的抑制作用,PA:3TC=100時,聯(lián)合用