大豆WRKY、Exo70及其相關(guān)基因在抗旱性與生長(zhǎng)發(fā)育中的功能.pdf

1、大量的研究表明WRKY及VQ互作蛋白在植物抗病抗逆響應(yīng)中發(fā)揮重要作用，但在大豆中尚無系統(tǒng)性的分析研究。為了研究大豆WRKY及VQ蛋白在大豆抗旱性中的功能，本研究通過定量PCR系統(tǒng)分析了大豆WRKY與VQ基因在干旱及ABA處理之后的表達(dá)變化，從中鑒定得到一批對(duì)干旱及ABA響應(yīng)的大豆WRKY與VQ基因，并對(duì)其中的VQ34、VQ58及WRKY56這三個(gè)基因進(jìn)行了更進(jìn)一步的功能分析。酵母雙雜交表明大豆VQ34與VQ58能同兩個(gè)WRKY亞家族的成

2、員特異性互作，說明它們可能通過影響WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物中發(fā)揮功能。氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn)大豆WRKY56與擬南芥WRKY51高度相似，在高度保守的WRKY功能域也有共同的氨基酸變異。為了直接研究這兩個(gè)WRKY基因的功能，我們已經(jīng)通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化技術(shù)獲取了擬南芥超表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株并對(duì)它們的抗旱性進(jìn)行了初步的分析。本研究也獲得了少量超表達(dá)的大豆轉(zhuǎn)基因植株，為今后進(jìn)一步研究打下了基礎(chǔ)。
　　本研究在對(duì)大豆WRKY家族分析過程中，發(fā)現(xiàn)其中一個(gè)成

3、員不但含有一個(gè)變異的WRKY功能域，還帶有一個(gè)特異的跨膜(TM)域。這個(gè)大豆WRKY相關(guān)蛋白(GmWRP1)沒有DNA結(jié)合活性，通過綠色熒光蛋白(GFP)融合表明GmWRP1并不在細(xì)胞核中，而是定位于高爾基體上。對(duì)大豆及其它植物蛋白組的系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn)該跨膜域還同一些胞外分泌復(fù)合體Exo70亞基蛋白結(jié)合，從而形成一個(gè)豆科植物特有的Exo70亞家族。熒光顯微觀察發(fā)現(xiàn)這些Exo70蛋白同樣也定位在高爾基體上。Gm WRP1在植物的根、花、莢和種