黃芪多糖、人參皂甙Rb1對豬口蹄疫疫苗的佐劑效果及相關(guān)機理研究.pdf

1、本試驗?zāi)康闹荚谝詢煞N補氣中藥成分為代表，對中藥成分作為疫苗佐劑機制進行研究。進行本試驗期望得到一種新型的、經(jīng)濟的豬口蹄疫疫苗的佐劑，提高現(xiàn)有疫苗的保護力，降低現(xiàn)有疫苗的副作用，降低豬口蹄疫的發(fā)病率，減少勞動費用，即這種佐劑能刺激機體產(chǎn)生較強的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)，同時，通過對佐劑作用機制的探索，將給新的佐劑開發(fā)提供一些試驗方法，具有良好的研究意義。試驗以常用補氣中藥黃芪和人參的主要有效成分——黃芪多糖和人參皂甙Rb1為代表，首先黃芪多

2、糖和人參皂甙Rb1直接與口蹄疫疫苗混勻，通過肌肉注射免疫小鼠和豬，觀察口蹄疫抗體效價的變化。試驗結(jié)果：小鼠一免15d抗體效價與對照組差異不顯著HAlog2＜7(p＞0.05)，二免后的小鼠抗體效價HAlog＞7與對照組比較差異極顯著(p＜0.01)；黃芪多糖(0.5mg/只)+疫苗組、黃芪多糖(0.1mg/只)+疫苗組和人參皂甙Rb1(0.01mg/只)+疫苗組與對照組差異極顯著(p＜0.01)，黃芪多糖(0.05mg/只)+疫苗組和人

3、參皂甙Rb1(0.002mg/只)+疫苗組與對照組差異顯著(p＜0.05)。經(jīng)過免疫的豬一免后抗體效價都沒有達到保護免疫效價(HAlog2＜7)，二免15d抗體效價遠遠高于一免的抗體效價(HAlog2＞7)，二免30d抗體效價比二免15d有些下降，但是高于只經(jīng)過一免的抗體效價(HAlog2＞7)。總之黃芪多糖和人參皂甙Rb1均能提高小鼠和豬只的口蹄疫抗體效價，并且隨著兩種成分濃度的增加對抗體效價的影響也隨之增強。隨后進行大鼠腸黏膜微血管

4、內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。通過對內(nèi)皮細(xì)胞第Ⅷ因子相關(guān)抗原和硝酸銀鑒定，證明培養(yǎng)的微血管內(nèi)皮細(xì)胞第Ⅷ因子相關(guān)抗原染色為陽性，AgNO3染色后，黑色的硝酸銀顆粒沉積在血管內(nèi)皮細(xì)胞邊緣即細(xì)胞間隙中，呈棕黃色，細(xì)胞間以鋸齒狀結(jié)構(gòu)連接，體現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)典型的多邊形。最后黃芪多糖、人參皂甙Rb1和口蹄疫疫苗同時作用細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間觀察內(nèi)皮細(xì)胞NO、IL-6和TNF-α分泌量的變化。試驗結(jié)果：口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)單獨作用于腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)