C、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌二價(jià)類毒素疫苗及抗毒素血清的研制.pdf

1、產(chǎn)氣莢膜梭菌在自然界是無處不在的，是多種健康動(dòng)物腸道的常在菌，能造成人及多種動(dòng)物發(fā)病，且有發(fā)病急、病程短、死亡快的特點(diǎn)，每年大量動(dòng)物因感染產(chǎn)氣莢膜梭菌而死亡，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失。C、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌能單獨(dú)或混合感染牛羊等多種動(dòng)物，引起動(dòng)物壞死性腸炎及腸毒血癥，且兩型感染短時(shí)間內(nèi)難以區(qū)分。為了控制產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的多種疾病，本試驗(yàn)研制了C、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素二價(jià)苗及抗毒素血清，有效預(yù)防并治療C、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌病。
　　隨著抗

2、生素的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌耐藥性逐漸增強(qiáng)，特別是產(chǎn)氣莢膜梭菌病一旦發(fā)生，抗生素難以治療，用產(chǎn)氣莢膜梭菌疫苗預(yù)防是最佳選擇。根據(jù)產(chǎn)氣莢膜梭菌致病是由其所產(chǎn)生外毒素引起的致病機(jī)理，本試驗(yàn)研制了安全、高效的類毒素疫苗。疫苗效力往往與抗原濃度成正比，為了提高抗原濃度，本試驗(yàn)選取實(shí)驗(yàn)室最佳菌株，將C型菌與D型菌以4∶3比例接種于同一培養(yǎng)基，高效產(chǎn)毒，測(cè)得毒素對(duì)小鼠的半數(shù)致死量2-5.8/mL，并用該毒素制備了產(chǎn)氣莢膜梭菌鋁膠苗和白油苗。
　　我國(guó)

3、現(xiàn)有產(chǎn)氣莢膜梭菌商品苗均為滅活鋁膠聯(lián)苗，免疫后發(fā)病時(shí)有發(fā)生，因此本試驗(yàn)研制了產(chǎn)氣莢膜梭菌二價(jià)苗。為了證明疫苗的安全性和有效性，將兩種疫苗做安全性檢驗(yàn)，測(cè)定外毒素對(duì)家兔的最小致死量，并使用不同劑量疫苗免疫家兔，21d后做攻毒保護(hù)試驗(yàn)。結(jié)果表明:兩種疫苗免疫家兔，免疫部位均無潰瘍及肉芽腫，28d后剖檢免疫部位無殘留疫苗存在，兩種疫苗均安全性良好;C型毒素對(duì)家兔的最小致死量為0.04mL，D型毒素對(duì)家兔的最小致死量為0.4mL;兩種疫苗不同劑

4、量免疫家兔，通過攻毒保護(hù)試驗(yàn)，測(cè)得鋁膠苗對(duì)家兔的最小免疫劑量為2mL，白油類毒素苗對(duì)家兔的最小免疫劑量為1mL。
　　產(chǎn)氣莢膜梭菌發(fā)病后用抗生素難以治療。抗血清作為一種快速的特異性治療制劑，能快速中和毒素，治療由C、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的中毒性疾病。本試驗(yàn)使用高濃度毒素制備的油苗作為第一免疫原，除菌外毒素作為第二免疫原，制備高效價(jià)抗毒素血清，用間接ELISA法監(jiān)測(cè)抗體水平變化，并使用小鼠中和試驗(yàn)檢驗(yàn)抗血清的抗體水平。結(jié)果表明:本試