米渣蛋白的提取及固定化酶水解米渣蛋白的研究.pdf

1、大米蛋白是公認(rèn)的優(yōu)質(zhì)植物蛋白，具有氨基酸配比合理和低過敏性等特性，非常適合作為嬰幼兒和特殊人群的營(yíng)養(yǎng)食品，國(guó)內(nèi)外對(duì)大米蛋白的研究都非常重視。本文主要研究了米渣蛋白的提取和改性及改性后功能性質(zhì)的研究。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 ⑴通過水提法提取米渣蛋白，通過單因素實(shí)驗(yàn)研究了提取時(shí)間，溫度，料液比和水洗次數(shù)對(duì)得到的蛋白提取率的影響，并采用正交試驗(yàn)對(duì)提取時(shí)間，溫度，料液比進(jìn)行優(yōu)化，得出在溫度800C，時(shí)間2h，料液比1：10，水洗次數(shù)1

2、次的條件下，蛋白提取率可達(dá)到71.83%。
　　 ⑵采用堿溶酸沉法提取米渣蛋白，通過單因素實(shí)驗(yàn)初步探討了溫度，堿濃度，提取時(shí)間，料液比對(duì)米渣蛋白提取率的影響，并采用響應(yīng)面法對(duì)提取時(shí)間，堿濃度，料液比參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，采用多元二次回歸方程擬合了三種因素與蛋白提取率的關(guān)系，預(yù)測(cè)最佳提取條件為：堿濃度0.288%， 時(shí)間2.2h，料液比1：11，溫度50℃，得到蛋白提取率理論值為72.50%，實(shí)驗(yàn)室測(cè)得值為70.49%。此實(shí)驗(yàn)方案可行。

3、
　　 ⑶以海藻酸鈉為載體，戊二醛為交聯(lián)劑研究了堿性蛋白酶的固定化方法，分別對(duì)海藻酸鈉濃度，酶濃度，氯化鈣濃度，戊二醛濃度和交聯(lián)時(shí)間進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn)，并采用響應(yīng)面法分析并優(yōu)化了固定化酶的條件，在海藻酸鈉濃度2.5%，酶濃度3mg/ml，氯化鈣濃度2%，戊二醛濃度4%時(shí)固定化酶活性回收率理論值為61.48%，實(shí)際測(cè)得值為58.34%。得到的固定化堿性蛋白酶的最適溫度60℃，最適pH為9，且具有良好的使用穩(wěn)定性和儲(chǔ)存穩(wěn)定性。

4、　　 ⑷采用固定化堿性蛋白酶水解堿法提取得到的米渣蛋白，并通過單因素和響應(yīng)面法對(duì)水解時(shí)間，酶與底物比，反應(yīng)pH參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。采用多元二次回歸方程擬合了三種因素與水解度的關(guān)系：預(yù)測(cè)最佳水解條件為水解時(shí)間2h，酶與底物比1:9，pH8.9，溫度60℃，在此條件下，預(yù)測(cè)理論值達(dá)到19.04%，實(shí)測(cè)水解度為17.74%，兩個(gè)結(jié)果基本吻合。
　　 ⑸通過研究水解得到的米渣蛋白肽，顯示其具有良好的溶解性，在pH2-10范圍內(nèi)保持相對(duì)較高