烏蘇里藜蘆生物堿單體成分計米丁的抗血栓藥效學研究.pdf

1、目的：計米丁是從烏蘇里藜蘆生物堿(VnA)中分離提純的單體成分之一。本實驗旨在研究計米丁的抗栓降粘作用及其對血小板聚集及凝血時間和出血時間的影響。 方法和結果： 一、靜脈注射計米丁半數(shù)致死量(LD<,50>)的測定：取小鼠50只，隨機分成5組，每組10只。受試藥物組動物分別尾靜脈勻速推注4種濃度(5.22，6.14，7.23，8.50 mg.kg<'-1>)的計米丁注射液，空白對照組動物給以等容量NS，用Bliss法計算

2、得小鼠靜脈注射計米丁的LD<,50>為6.6619 mg.kg<'-1>，其95﹪可信限為5.6120 mg.kg<'-1>～7.9080 mg.kg<'-1>。 二、對電刺激大鼠頸動脈血栓形成的影響：取SD大鼠，按電刺激法造成頸動脈血栓模型，觀察計米丁對血管堵塞時間(OT)的影響，并作量效關系分析。結果表明，與NS陰性對照組相比，計米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、

3、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>組iv后OT延長百分率分別為16.4﹪(P<0.05)、27.3﹪、33.8﹪、43.9﹪及66.0﹪(P<0.01)；陽性對照藥LAS(賴安匹林) 18.0mg.kg<'-1> iv后OI、延長百分率為52.3﹪(p<0.01)。 三、對大鼠下腔靜脈血栓形成的影響：取SD大鼠，隨機均分為7組：NS陰性對照組，肝素400.0μg.kg<'-1>陽性對照組，計米丁1.

4、25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1> iv組。按Rayer氏法造成大鼠下腔靜脈血栓形成模型，觀察各組對血栓形成率和血栓干重的影響。結果表明，與NS組相比，計米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后血栓干重抑

5、制率分別為7.0﹪(P>0.05)、58.8﹪、70.4﹪、72.9﹪和83.0﹪(P<0.01)：陽性對照藥肝素400.0μg.kg<'-1>iv后的血栓干重抑制率為85.0﹪(p<0.01)。 四、對大鼠血小板聚集的影響1.對大鼠體外血小板聚集的影響：取SD大鼠，心臟采血，按常規(guī)制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)。以ADP(終濃度為3μmol/L)為血小板聚集誘導劑。按Born氏法(比濁沉淀法)測定血小板5

6、min最大聚集率。結果表明，與NS組相比，計米丁終濃度6.25 gg/L、12.50μg/L、25.00gg/L和50.00μg/L對血小板聚集抑制率分別為19.39﹪、33.55﹪、46.14﹪和61.26﹪；終濃度40.0mg/L的LAS對血小板聚集抑制率為42.23﹪。 2.對大鼠體內血小板聚集的影響：取SD大鼠，隨機均分為6組：NS陰性對照組，LAS 18.0mg.kg<'-1> 陽性對照組以及計米丁2.50μg．kg

7、<'-1>、5.00gg．kg<'-1>、10.00gg．kg叫和20.00μg.kg<'-1>組，按4.1項下方法測定血小板5min最大聚集率。結果表明，與NS組相比，計米丁2.50gg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后抑制血小板聚集率分別為22.67﹪、39.87﹪、47.39﹪和62.93﹪(P<0.01)：陽性對照藥LAS 18.0mg.kg<'-

8、1>iv后抑制血小板聚集率為47.21﹪(p<0.01)。 五、對小鼠凝血時間的影響：取昆明種小鼠，隨機均分為7組：NS陰性對照組，肝素1.25mg.kg<'-1>陽性對照組，計米丁1.25gg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>組，測定小鼠全血凝血時間(CT)，以NS組為基準計算各給藥組CT延長百分率。結果表明，計米丁1.

9、25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>和20.00μg.kg<'-1>iv后血栓CT延長百分率分別為-0.81﹪(P>0.05)、119.14﹪、159.92﹪、228.74﹪和195.14﹪(P<0.01)，陽性對照藥肝素1.25mg.kg<'-1>iv后CT延長61.13﹪(p<0.01)。 六、對小鼠尾出血時間的影響：取昆明種小鼠，隨機均分為6組

10、：NS陰性對照組，肝素1.25mg.kg<'-1>陽性對照組，以及計米丁1.25 μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>和10.00μg.kg<'-1>組，按斷尾法觀察小鼠尾出血時間(BT)，以NS組為基準計算各給藥組BT延長百分率。結果表明，計米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>、10.00μg.kg<'-1>iv后血栓BT延長率分別為4

11、7.13﹪、58.05﹪、121.84﹪和105.17﹪(P<0.01)，陽性對照藥肝素1.25mg.kg<'-1>iv后BT延長78.16﹪(p<0.01)。 七、對家兔血液流變學的影響：取家兔，隨機均分為4組，分別耳緣靜脈注射計米丁1.25μg.kg<'-1>、2.50μg.kg<'-1>、5.00μg.kg<'-1>和10.00μg.kg<'-1>，測定全血粘度和血漿粘度，以藥前為基準計算給藥后各時間點血液流變學參數(shù)的變