應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)提高膽管癌臨床診斷及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)提高膽管癌臨床診斷及相關(guān)機(jī)制的研究姓名：吳晰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué) 消化病指導(dǎo)教師：陸星華20091001北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文中A U R K A m R N A 和蛋白水平的差異。同時(shí)，用免疫組化方法檢測(cè)2 9 例膽管癌組織中A U R K A 的表達(dá)情況，并與炎性膽道組織對(duì)比，分析A U R K A 表達(dá)水平與腫瘤病理分期和組織學(xué)分級(jí)的相關(guān)性。

2、結(jié)果熒光原位雜交結(jié)果顯示：膽道腫瘤細(xì)胞株及膽管癌組織內(nèi)存在廣泛的細(xì)胞染色體非整倍體改變，而正常組織細(xì)胞內(nèi)染色體基本呈二體性。應(yīng)用U r o V y s i o n 探針通過(guò)F I S H 技術(shù)檢測(cè)2 7 例膽管細(xì)胞刷標(biāo)本的3 號(hào)、7 號(hào)、1 7 號(hào)和9 p 2 l 基因位點(diǎn)，以染色體數(shù)目異常為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)( 即：多條染色體多體性細(xì)胞≥5 個(gè)或單染色體三體性細(xì)胞三1 0 個(gè)) ，其對(duì)膽道腫瘤的診斷敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別

3、為：5 0 ％、1 0 0 ％、1 0 0 ％、3 1 ．3 ％；而常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為：2 2 ．7 ％、1 0 0 ％、1 0 0 ％和2 2 ．7 ％，二者比較，沒(méi)有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P = 0 ．1 4 6 ) ．在本研究中，3 號(hào)染色體多體性是F I S H 陽(yáng)性患者染色體異常的主要形式，并且可以見(jiàn)到9 p 2 l 的純合缺失。用R e a l ．T i m eP C R 和W e s

4、t e r n B l o t 方法分別檢測(cè)A U R K A m R N A 和蛋白水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在腫瘤細(xì)胞株Q B C 9 3 9 和G B C ．S D 中，A U R K A 的表達(dá)水平明顯高于胎肝細(xì)胞和正常膽道上皮及肝細(xì)胞；免疫組化染色顯示A U R K A 在膽管癌組織中表達(dá)增加，且A U R K A 表達(dá)量與腫瘤病理分期和組織學(xué)分型具有相關(guān)性．結(jié)論膽管癌中廣泛存在細(xì)胞非整倍體改變。通過(guò)熒光原位雜交檢測(cè)可以在一定程度上提高