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文檔簡介
1、目的:研究脂肪干細胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)在體外分離培養(yǎng)和在一定條件下誘導分化為脂肪細胞和成骨細胞的能力,探討其作為骨組織工程細胞的可行性。
方法:無菌切取SD大鼠腹股溝處的皮下脂肪,Ⅰ型膠原酶消化法獲取原代脂肪干細胞,接種至含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,培養(yǎng)并適時傳代,每日在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞形態(tài)和增殖特征。第3代細胞分別在成脂成骨誘導液中誘導分化,并采
2、用油紅染色,堿性磷酸酶(ALP)染色,Von Kossa染色進行鑒定。
結果:從大鼠脂肪組織中分離出的脂肪干細胞,在體外呈成纖維細胞樣迅速增殖,可在異丁基-甲基黃嘌呤、地塞米松、胰島素等誘導下,表現出脂肪細胞特性;可以在地塞米松、抗壞血酸、β—甘油磷酸鈉的誘導下,表現出成骨細胞特性,該細胞堿性磷酸酶(ALP)染色ALP活性顯著增高,Von Kossa染色出現礦化結節(jié)。
結論:ADSCs易于在體外分離培養(yǎng),并擴增迅速,
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