大鼠脂肪干細(xì)胞分離培養(yǎng)及成脂成骨分化潛能的研究.pdf

1、目的:研究脂肪干細(xì)胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)在體外分離培養(yǎng)和在一定條件下誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞的能力,探討其作為骨組織工程細(xì)胞的可行性。
　　方法:無菌切取SD大鼠腹股溝處的皮下脂肪,Ⅰ型膠原酶消化法獲取原代脂肪干細(xì)胞,接種至含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,培養(yǎng)并適時傳代,每日在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞形態(tài)和增殖特征。第3代細(xì)胞分別在成脂成骨誘導(dǎo)液中誘導(dǎo)分化,并采

2、用油紅染色,堿性磷酸酶(ALP)染色,Von Kossa染色進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果:從大鼠脂肪組織中分離出的脂肪干細(xì)胞,在體外呈成纖維細(xì)胞樣迅速增殖,可在異丁基-甲基黃嘌呤、地塞米松、胰島素等誘導(dǎo)下,表現(xiàn)出脂肪細(xì)胞特性;可以在地塞米松、抗壞血酸、β—甘油磷酸鈉的誘導(dǎo)下,表現(xiàn)出成骨細(xì)胞特性,該細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)染色ALP活性顯著增高,Von Kossa染色出現(xiàn)礦化結(jié)節(jié)。
　　結(jié)論:ADSCs易于在體外分離培養(yǎng),并擴增迅速,