腫瘤化療抗性細(xì)胞中抗凋亡基因與死亡信號(hào)分子的作用研究.pdf

1、目的:分析抗凋亡基因survivin和bcl-2在不同腫瘤細(xì)胞株中的表達(dá)差異.探討腫瘤細(xì)胞被化療藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的藥物抵抗同抗凋亡基因表達(dá)變化的相互關(guān)系,并分析化療藥物處理前后腫瘤細(xì)胞對(duì)死亡信號(hào)分子TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的敏感性變化及相應(yīng)的抗凋亡基因表達(dá),從而更深入的了解化療藥物引起的殘存腫瘤細(xì)胞的抗凋亡特性,為評(píng)估化療效果和尋找新的有效殺瘤靶點(diǎn)提供依據(jù).方法:利用經(jīng)典的RT-PCR方法檢測(cè)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞survivin及bcl-2表

2、達(dá).利用凝膠成像系統(tǒng)和內(nèi)對(duì)照半定量分析它們的表達(dá)變化.利用MTT法測(cè)定藥物對(duì)于藥物處理后腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制的變化.利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)化療藥物處理前后其細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)的變化.利用脂質(zhì)體包裹DNA轉(zhuǎn)染BHK細(xì)胞.將轉(zhuǎn)染TRAIL的BHK細(xì)胞與經(jīng)過藥物處理的MA782細(xì)胞混合,檢測(cè)其survivin及bcl-2表達(dá)變化和細(xì)胞凋亡指數(shù)的變化.結(jié)論:抗凋亡基因表達(dá)在不同腫瘤細(xì)胞株中存在差異.鹽酸阿霉素(ADM)引起的細(xì)胞大量死亡同細(xì)胞凋亡相