丁吡嗎啉對(duì)致病疫霉的生物活性及其室內(nèi)抗性風(fēng)險(xiǎn)初探.pdf

1、丁吡嗎啉(pyrimorph)是我國(guó)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的一種新型殺菌劑，化學(xué)名為(E)-3-(2-氯吡啶4-基)-3-(4-叔丁基苯基)-丙烯酰嗎啉。在離體條件下，丁吡嗎啉對(duì)致病疫霉Phytophthorainfestans、辣椒疫霉Phytophthoracapsici、古巴假霜霉Pseudoperonosporacubensis等卵菌均有很好的抑制活性，在對(duì)卵菌病害的防治中具有廣泛的市場(chǎng)潛力。 致病疫霉是馬鈴薯和番茄生產(chǎn)上最嚴(yán)

2、重的病害之一。由于傳統(tǒng)殺卵菌藥劑的長(zhǎng)期大量使用，田間已經(jīng)產(chǎn)生了廣泛的抗藥性，尋找新型殺菌劑來(lái)控制晚疫病的流行已經(jīng)成為化學(xué)防治工作者的目標(biāo)。所以研究丁吡嗎啉對(duì)致病疫霉的生物活性及其抗藥性有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 盆栽試驗(yàn)表明：丁毗嗎啉在防治番茄晚疫病時(shí)具有良好的保護(hù)效果，但治療效果較差。用濃度為400和800mg/L的丁吡嗎啉對(duì)番茄植株噴霧，自然風(fēng)干后接種致病疫霉的孢子懸浮液，其保護(hù)效果分別為94.1％和100％。番茄植株前期接菌處理，

3、24h后用濃度為400、800和1000mg/L，的丁吡嗎啉對(duì)番茄植株噴霧，其治療效果分別是39.3％、64.9％和84.7％。表明丁吡嗎啉在防治番茄晚疫病時(shí)的保護(hù)效果優(yōu)于其治療效果。 用濃度為400mg/L的丁吡嗎啉噴霧番茄植株，施藥后1、3和8d分別接種致病疫霉的孢子懸浮液，其防治效果分別為94.1％、90.8％和78.1％；用濃度為800mg/L的丁吡嗎啉噴霧，施藥后1、3和8d接菌，其防治效果分別為100％、98.4％和

4、100％。初步說(shuō)明丁吡嗎啉在防治番茄晚疫病時(shí)持效期長(zhǎng)于8天。 丁吡嗎啉在2000mg/L的高濃度下處理番茄植株根部，施藥48h后接種致病疫霉孢子懸浮液，其對(duì)番茄晚疫病的防治效果僅為36.1％。初步說(shuō)明番茄根系對(duì)丁吡嗎啉有一定的內(nèi)吸性，但內(nèi)吸輸導(dǎo)性較差。 番茄葉片內(nèi)橫向輸導(dǎo)性的研究發(fā)現(xiàn)：用2000mg/L的高濃度丁吡嗎啉涂抹番茄葉片，其對(duì)葉片處理部位(即中部)的防治效果高達(dá)95.3％，但對(duì)處理部位上部的防治效果僅為65.3

5、％，對(duì)處理部位下部的防治效果僅為31.8％。其它低濃度的丁吡嗎啉處理結(jié)果與此相似。初步說(shuō)明丁吡嗎啉在葉片內(nèi)有一定的橫向輸導(dǎo)性，丁吡嗎啉在番茄葉片上具有向葉片頂端的輸導(dǎo)性，對(duì)葉片基部的輸導(dǎo)能力較差。 從掃描電鏡圖看出，丁吡嗎啉對(duì)致病疫霉菌菌絲形態(tài)有一定的影響，細(xì)胞壁局部形成皺縮、畸形。由此推測(cè)，其原因可能是菌絲內(nèi)含物的減少，或是對(duì)菌絲細(xì)胞壁合成、組裝的影響。 經(jīng)過(guò)含藥培養(yǎng)基馴化10代，獲得了2株致病疫霉的抗丁吡嗎啉的突變體

6、菌株F5和F8，對(duì)突變菌株敏感性進(jìn)行測(cè)定，抗性菌株的抗性倍數(shù)分別是1.96和5.17。經(jīng)過(guò)紫外線輻射新生菌絲的方法，獲得了5株致病疫霉的抗丁吡嗎啉的突變體菌株，對(duì)突變菌株敏感性進(jìn)行測(cè)定，最高抗性菌株UV15的抗性倍數(shù)是7.66，最低抗性菌株UV11的抗性倍數(shù)為1.53。 對(duì)突變體菌株的生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，突變體菌株的抗性上升速度較慢，抗性突變體菌株在培養(yǎng)基平板上的菌絲生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢能力較親本菌株有明顯的下降。發(fā)現(xiàn)抗性菌株抗性

7、倍數(shù)越高，其菌絲生長(zhǎng)速率越慢，產(chǎn)生的孢子囊的量也越少。在4、17和35℃下分別保存30d后，致病疫霉的抗丁吡嗎啉突變體菌株和其親本菌株的菌絲生長(zhǎng)速率都沒(méi)有受到影響，說(shuō)明抗藥突變體菌株也能抵抗低溫或高溫等逆境，正常完成越冬或越夏過(guò)程。在繼代培養(yǎng)10代后，抗性突變體菌株對(duì)丁吡嗎啉的菌絲生長(zhǎng)速率EC50值沒(méi)有顯著變化，說(shuō)明抗性是由遺傳基因的突變引起的，而非對(duì)藥劑的一種暫時(shí)性的適應(yīng)。 綜上所述，在室內(nèi)通過(guò)藥劑馴化和紫外線輻射新生菌絲的方

8、法，均能獲得致病疫霉病菌對(duì)丁吡嗎啉的抗藥性突變體菌株，證明了丁吡嗎啉存在一定的抗性風(fēng)險(xiǎn)。但是抗性突變體菌株的總體適合度較敏感親本菌株有所下降，不利于抗藥群體的發(fā)展，致病疫霉對(duì)丁吡嗎啉的抗性風(fēng)險(xiǎn)可能較低。但是由于致病疫霉病菌屬于高抗性風(fēng)險(xiǎn)性病菌，因此在尚未獲得足夠的田間試驗(yàn)數(shù)據(jù)前，為了延緩抗性的發(fā)生，應(yīng)與其他無(wú)交互抗性的農(nóng)藥交替使用，盡量減少藥劑的施用頻率，并加強(qiáng)開(kāi)發(fā)更多的混劑配方。同時(shí)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)田間及保護(hù)地多次施用該藥劑后真菌群體中抗性菌