四個(gè)品種初生雛雞腿肌差異表達(dá)序列標(biāo)簽（ESTs）的篩選及表達(dá)分析.pdf

1、本研究利用DDRT-PCR，比較了初生絲羽烏骨雞(SK)、常羽烏骨雞(NP)，愛撥益加(AA)肉雞和尼克(NK)蛋雞腿肌組織的基因表達(dá)的差異?！　”緦?shí)驗(yàn)采用3個(gè)26bp的T7(dT11)N為錨定引物，24個(gè)26bp的M13-ARPs為隨機(jī)引物，組成72個(gè)引物組合對(duì)上述四個(gè)品種雛雞腿肌組織進(jìn)行DDRT-PCR反應(yīng)。采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)合銀染方法分離差異片段，共獲得214個(gè)差異片段，經(jīng)重?cái)U(kuò)增和純化后得到101個(gè)條帶。利用單鏈構(gòu)象

2、多態(tài)性(SSCP)技術(shù)驗(yàn)證差異顯示片段重?cái)U(kuò)增純化產(chǎn)物的單一性，共得到87條單一片段。通過基因芯片雜交技術(shù)對(duì)獲得的差異顯示cDNA片段真實(shí)性進(jìn)行鑒定，得到6條真實(shí)表達(dá)的差異條帶，僅5條測(cè)序成功?！　》治雠c表達(dá)序列標(biāo)簽同源的已知功能的差異表達(dá)基因表明：已知功能的差異表達(dá)基因可能與初生雛雞腿肌的生長(zhǎng)發(fā)育、分化以及色素沉積有一定關(guān)系。COXⅢ基因在絲羽烏骨雞和尼克蛋雞中特異表達(dá)，而在山地烏骨雞和AA肉雞未表達(dá)，暗示COXⅢ基因的差異表達(dá)與腿肌

3、在初生階段的生長(zhǎng)發(fā)育中有關(guān)。M-CK基因在AA肉雞中特異表達(dá)，而在其余三種雞中不表達(dá)，推測(cè)M-CK基因在促進(jìn)初生雛雞腿肌的發(fā)育和分化中起著重要調(diào)控作用。14-3-3ε基因在SK中不表達(dá)，在NP、AA肉雞、NK蛋雞中特異表達(dá)，推測(cè)14-3-3ε的表達(dá)可能在雞的初生階段腿肌黑色素的合成或運(yùn)輸中起著重要的調(diào)控作用?！　OXⅢ和M-CK基因在能量代謝、肌肉的生成中起著重要的作用，可見四個(gè)品種的初生雛雞腿肌在生長(zhǎng)發(fā)育上的顯著差異，可能與這兩個(gè)