四個品種初生雛雞腿肌差異表達序列標簽（ESTs）的篩選及表達分析.pdf

1、本研究利用DDRT-PCR，比較了初生絲羽烏骨雞(SK)、常羽烏骨雞(NP)，愛撥益加(AA)肉雞和尼克(NK)蛋雞腿肌組織的基因表達的差異?！　”緦嶒灢捎?個26bp的T7(dT11)N為錨定引物，24個26bp的M13-ARPs為隨機引物，組成72個引物組合對上述四個品種雛雞腿肌組織進行DDRT-PCR反應(yīng)。采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)合銀染方法分離差異片段，共獲得214個差異片段，經(jīng)重擴增和純化后得到101個條帶。利用單鏈構(gòu)象

2、多態(tài)性(SSCP)技術(shù)驗證差異顯示片段重擴增純化產(chǎn)物的單一性，共得到87條單一片段。通過基因芯片雜交技術(shù)對獲得的差異顯示cDNA片段真實性進行鑒定，得到6條真實表達的差異條帶，僅5條測序成功?！　》治雠c表達序列標簽同源的已知功能的差異表達基因表明：已知功能的差異表達基因可能與初生雛雞腿肌的生長發(fā)育、分化以及色素沉積有一定關(guān)系。COXⅢ基因在絲羽烏骨雞和尼克蛋雞中特異表達，而在山地烏骨雞和AA肉雞未表達，暗示COXⅢ基因的差異表達與腿肌

3、在初生階段的生長發(fā)育中有關(guān)。M-CK基因在AA肉雞中特異表達，而在其余三種雞中不表達，推測M-CK基因在促進初生雛雞腿肌的發(fā)育和分化中起著重要調(diào)控作用。14-3-3ε基因在SK中不表達，在NP、AA肉雞、NK蛋雞中特異表達，推測14-3-3ε的表達可能在雞的初生階段腿肌黑色素的合成或運輸中起著重要的調(diào)控作用?！　OXⅢ和M-CK基因在能量代謝、肌肉的生成中起著重要的作用，可見四個品種的初生雛雞腿肌在生長發(fā)育上的顯著差異，可能與這兩個