腹腔注射L-NAME建立先天性肥厚性幽門狹窄犬動(dòng)物模型的研究神經(jīng)元型一氧化氮合酶在先天性肥厚性幽門狹窄幽門的表達(dá).pdf

1、1.目的:本研究旨在通過(guò)給予Beagle孕犬腹腔注射一氧化氮合酶(NOS)抑制劑L-NAME，觀察新生犬生長(zhǎng)發(fā)育及幽門環(huán)肌層厚度的情況，探索建立先天性肥厚性幽門狹窄(CHPS)犬動(dòng)物模型。
　　方法:將4只成年受孕Beagle犬分為模型組和正常組，模型組為3只成年受孕Beagle犬，正常組為1只成年受孕Beagle犬。自分娩期前85天至分娩期前1天，模型組給予腹腔注射L-NAME，正常組給予腹腔注射等量0.9％氯化鈉。模型組和正常

2、組母犬產(chǎn)下的新生犬生后31天、38天、45天和52天分別稱重，生后52天，選取模型組體重增長(zhǎng)緩慢的新生犬和正常組新生犬各5只作為研究對(duì)象，外科手術(shù)取幽門組織作切片和HE染色后顯微鏡下測(cè)量近胃竇部幽門環(huán)肌層厚度。
　　結(jié)果:
　　(1)模型組和正常組母犬用藥期間均無(wú)死亡、流產(chǎn)及早產(chǎn)等不良反應(yīng)。
　　(2)模型組產(chǎn)新生犬14只，正常組產(chǎn)新生犬5只，所有新生犬未發(fā)現(xiàn)有肢體發(fā)育異常情況。
　　(3)與正常組相比，模型組新

3、生犬體重增長(zhǎng)較緩慢，兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(4)與正常組相比，模型組幽門肌層明顯增生肥厚，尤其以幽門環(huán)肌層為主，肌纖維排列紊亂。兩組幽門肌厚度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:給予Beagle孕犬腹腔注射L-NAME可建立類似CHPS犬動(dòng)物模型。
　　2.目的:了解神經(jīng)元型一氧化氮合酶（nNOS）在幽門區(qū)的表達(dá)及其與先天性肥厚性幽門狹窄（CHPS）的關(guān)系，以進(jìn)一步研究CHPS的致病機(jī)制。
　　方法:將4只

4、成年受孕Beagle犬分為模型組和正常組，模型組成年受孕Beagle犬為3只，正常組成年受孕Beagle犬為1只。自分娩期前85天至分娩期前1天，模型組母犬給予腹腔注射NOS抑制劑L-NAME，建立CHPS犬模型。正常組母犬給予腹腔注射等量0.9%氯化鈉溶液，兩組新生犬生后第31天、38天、45天及52天分別稱重，生后52天，選取模型組中體重增長(zhǎng)緩慢的新生犬和正常組新生犬各5只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，外科手術(shù)取幽門組織作切片。HE染色后顯微鏡下測(cè)

5、量近胃竇部幽門環(huán)肌厚度，免疫組化后運(yùn)用圖像分析技術(shù)分別測(cè)定nNOS表達(dá)的陽(yáng)性面積（Area）、平均光密度（MD）和積分光密度（IOD）三項(xiàng)指標(biāo)作定量分析，并與體重、幽門環(huán)肌厚度作相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:
　　(1)nNOS主要表達(dá)于幽門環(huán)肌和縱肌間的腸肌神經(jīng)叢細(xì)胞胞漿內(nèi)，模型組中nNOS染色陽(yáng)性神經(jīng)纖維表達(dá)的Area和IOD及MD均較正常組減少,差異具有顯著性。
　　(2)模型組幽門組織中nNOS表達(dá)的IOD分別與該組