核心蛋白聚糖在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及作用機(jī)制研究.pdf

1、肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一，預(yù)后差，通?；颊咴?-20個(gè)月內(nèi)死亡。目前治療原則是以外科手術(shù)治療為主的綜合治療，非手術(shù)治療包括局部腫瘤治療、放射治療、化學(xué)治療和生物治療，肝移植技術(shù)逐漸走向成熟，但也主要適用于早期肝癌患者，晚期患者預(yù)后不佳，加之費(fèi)用昂貴、供體緊缺，不能廣泛造福于患者。人們一直在探尋更為有效的治療肝癌的藥物和方法。
　　核心蛋白聚糖(Decorin，D

2、CN)是機(jī)體重要的細(xì)胞外基質(zhì)成分之一，屬于富含小型亮氨酸蛋白聚糖基因家族（SLRP）的成員。有大量體外研究證實(shí)DCN能夠抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖。其抑制腫瘤細(xì)胞的機(jī)制主要有：
　?。?）結(jié)合并抑制TGF-β生物活性，減少腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移。
　?。?）DCN可以調(diào)整細(xì)胞周期，使G1期細(xì)胞數(shù)增加，S期細(xì)胞數(shù)顯著降低，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。
　　（3）DCN可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。因此，DCN可能作為肝細(xì)胞肝癌一種新的治療靶點(diǎn)。深入的了

3、解DCN，對于肝癌預(yù)防和治療都具有重要的意義。
　　目的：
　　研究核心蛋白聚糖在肝細(xì)胞肝癌組織中的表達(dá)情況及其對HuH7細(xì)胞系體外增殖的影響。探討揭示DCN與原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為肝癌新基因治療靶點(diǎn)選擇提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1．以免疫組織化學(xué)(SP法)分別檢測16例正常肝組織、20例肝硬化組織、30例肝癌及癌旁組織中DCN的表達(dá)，采用陽性表達(dá)率及光密度值，進(jìn)行半定量及定量分析。
　　2．

4、加入含不同濃度(0、25、50、75、100、125、150、200ng／ml)DCN的培養(yǎng)液培養(yǎng)HuH7細(xì)胞系不同時(shí)間（12、24、48、72、96h、2W），用二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽(MTT)法及克隆實(shí)驗(yàn)測定細(xì)胞增殖速度和活力，流式細(xì)胞技術(shù)測定細(xì)胞周期和凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　1.DCN在肝硬化及癌旁組織中呈強(qiáng)陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率（55％、73.3％）、平均光密度值（OD）（0.2357±0.0396、0.2983

5、±0.1990）與正常肝組織及肝癌組織陽性表達(dá)率（0、10％）、平均OD（0.1394±0.0072、0.1589±0.0115）比較，表達(dá)有顯著性差異。結(jié)果提示DCN在癌旁及肝硬化組織中呈陽性表達(dá)，在肝癌及正常肝組織中為弱陽性表達(dá)。
　　2.DCN對HuH7細(xì)胞增殖抑制作用呈濃度和時(shí)間依賴性。DCN可以調(diào)整細(xì)胞周期，使G1期細(xì)胞數(shù)增多，S期減少，G2期無變化，提示DCN可抑制腫瘤細(xì)胞由G1/S轉(zhuǎn)化。DCN作用HuH7細(xì)胞后，Hu