急性肺損傷時(shí)ICAM-1和E，P-selectin的變化及聯(lián)合應(yīng)用氨溴索與小劑量肝素的影響.pdf

1、目的：急性肺損傷是一種失控的炎癥反應(yīng)，發(fā)病機(jī)理錯(cuò)綜復(fù)雜，其發(fā)病機(jī)制迄今仍未完全闡明，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞黏附分子參與了急性肺損傷的發(fā)病過(guò)程。本文制作油酸型日本大耳白兔ALI模型并檢測(cè)ICAM-1、E-selectin和P-selectin在實(shí)驗(yàn)兔血清、肺組織及BALF中的變化情況以探討三者在ALI中的作用并觀察聯(lián)合應(yīng)用氨溴索與小劑量肝素對(duì)其的影響。 方法：健康日本大耳白兔24只，隨機(jī)分成3組，每組8只：生理鹽水對(duì)照組(NC組)，油

2、酸損傷組(OA組)，氨溴索+小劑量肝素治療組(AH組)。各組動(dòng)物以25％烏拉坦(1.0mg.kg-1)麻醉后作頸正中部切開(kāi)，分離左頸總動(dòng)脈供采血用；并經(jīng)氣管切開(kāi)插入氣管導(dǎo)管行機(jī)械通氣。將后兩組實(shí)驗(yàn)兔按0.08ml·kg-1的油酸劑量經(jīng)耳緣靜脈法靜注，建立油酸型ALI模型。動(dòng)物模型制備成功后，AH組自耳緣靜脈輸入氨溴索(14mg.kg-1)+小劑量肝素(50u.kg-1h-1)，持續(xù)6h(化入林格氏液中微泵維持劑量)，NC組及OA組自耳緣

3、靜脈輸入等量生理鹽水。實(shí)驗(yàn)期間所有動(dòng)物均經(jīng)靜脈持續(xù)輸入乳酸鈉林格注射液8mg.kg-1h-1，持續(xù)6h。各組大耳白兔分別在輸入氨溴索+小劑量肝素或生理鹽水(以下簡(jiǎn)稱給藥)前和給藥后1、2、4、6h采血及測(cè)定PaO2，給藥6h后處死動(dòng)物并迅速剖胸取肺臟，肉眼觀察肺病理改變、行支氣管肺泡灌洗、留取肺組織標(biāo)本及測(cè)定濕干重比值。生化法檢測(cè)SOD、MDA，ELISA法檢測(cè)ICAM-1、E-選擇素，TUNEL法檢測(cè)凋亡指數(shù)，免疫組化檢測(cè)P-選擇素，

4、放免法檢測(cè)TxB2與6-keto-PGF1α，電鏡觀察肺組織超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果：①肺大體觀察：OA組呈暗紅色，表面有點(diǎn)狀、片狀出血、灶性實(shí)變及梗死；AH組上述表現(xiàn)減輕；NC組無(wú)上述改變。②電鏡下觀察：OA組Ⅱ型上皮細(xì)胞多數(shù)板層小體排空現(xiàn)象明顯，形成空泡；AH組上述表現(xiàn)減輕；NC組無(wú)上述改變。③與NC組比較，AH組及OA組血液中PaO2、SOD活力均降低(P＜0.01)但AH組與OA組比較顯著升高(P＜0.01)，AH組及OA組

5、MDA含量、TxB2/6-keto-PGF1α的比值均升高(P＜0.05或P＜0.01)但AH組與OA組比較均降低(P＜0.05或P＜0.01)；與同組給予治療藥物前Oh比較，NC組無(wú)差異(P＞0.05)，OA組各時(shí)點(diǎn)PaO2、SOD活力均降低(P＜0.05或P＜0.01)、MDA含量無(wú)差異(P＞0.05)、TxB2/6-keto-PGF1α的比值顯著升高(P＜0.01)，AH組PaO2、SOD活力升高(P＜0.05或P＜0.01)、M

6、DA含量及TxB2/6-keto-PGF1α的比值降低(P＜0.05或P＜0.01)。④與NC組比較，AH組及OA組血漿、BALF及肺組織中ICAM-1、E-selectin的濃度顯著升高(P＜0.01)但AH組與OA組比較顯著降低(P＜0.01)；與同組給予治療藥物前Oh比較，NC組ICAM-1無(wú)差異(P＞0.05)、E-selectin顯著升高(P＜0.01)，OA組及AH組兩者指標(biāo)均顯著升高(P＜0.01)。⑤肺組織中P-sele

7、ctin在OA組表達(dá)較為廣泛：主要為炎癥細(xì)胞、毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞和血管內(nèi)的血漿等，NC組呈低水平表達(dá)，AH組的表達(dá)介于兩者之間。⑥與NC組比較，AH組及OA組肺組織中MDA含量、AI、W/D及BALF中MDA含量顯著升高(P＜0.01)但AH組與OA組比較顯著降低(P＜0.01)；肺組織及BALF中SOD活力顯著下降(P＜0.01)但AH組與OA組比較顯著升高(P＜0.01)。⑦細(xì)胞凋亡以O(shè)A組最為明顯，NC組未見(jiàn)細(xì)胞凋亡或偶有凋亡，A