內皮細胞ICAM-1與SHP-2蛋白互作及其在急性肺損傷的作用.pdf

1、急性肺損傷（acute lung injury，ALI）表現為毛細血管內皮細胞和肺泡上皮細胞損傷，毛細血管通透性增加，血細胞和蛋白質液體滲出，肺泡和肺間質水腫，嚴重時發(fā)展成為急性呼吸窘迫綜合癥（acute respiratory distress syndrome，ARDS）。內皮細胞主要功能蛋白分子血管內皮鈣粘蛋白(VE-cadherin)在炎癥發(fā)生發(fā)展過程中起到了重要作用，該蛋白介導了內皮細胞通透性的調節(jié)和中性粒細胞的跨膜遷移。影響

2、血管內皮鈣粘蛋白功能的相關分子還有內皮細胞上的細胞間粘附分子-1(ICAM-1)，該分子通過內皮細胞內信號傳導來調控中性粒細胞在內皮細胞上的粘附和跨細胞遷移。ICAM-1介導的中性粒細胞粘附是如何調控VE-cadherin介導的中性粒細胞跨膜遷移的分子機制還不清楚。
　　在該研究中，我們通過免疫沉淀技術研究內皮細胞中ICAM-1、VE-cadherin和SHP-2間的蛋白互作情況，以及蛋白互作對內皮細胞功能的影響，SHP-2敲減對

3、內皮細胞功能的影響。并探討SHP-2作為ICAM-1下游信號分子在中性粒細胞的粘附、跨內皮細胞遷移和維持內皮細胞通透性中的作用，以及ICAM-1分子介導的信號通路與急性肺損傷間的相互關系。試驗結果表明，SHP-2介導了中性粒細胞的遷移。首先ICAM-1與SHP-2形成免疫復合物，SHP-2敲減使內皮細胞Src的磷酸化水平升高，而ICAM-1信號通路激活介導的Src活化反而降低。另外，SHP-2敲減使中性粒細胞在內皮細胞上的粘附增加，而中

4、性粒細胞跨內皮細胞遷移卻受到了一定程度地抑制。為了進一步研究SHP-2介導中性粒細胞遷移的分子機理，我們用免疫沉淀試驗來闡明。實驗結果進一步顯示，VE-cadherin可以與ICAM-1和SHP-2形成免疫復合體。ICAM-1交聯激活使VE-cadherin與ICAM-1分離，而SHP-2敲減也有效地抑制了VE-cadherin與ICAM-1的結合。從動物試驗的結果可以看出，SHP-2敲減促進了LPS介導的中性粒細胞在小鼠肺臟的募集，但