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文檔簡介
1、目的:
觀察慢性應(yīng)激對卵泡發(fā)育和動情周期的影響及其對卵泡發(fā)育的非促性腺激素依賴的影響。選取GDF-9、BMP-15、bFGF、SCF四個代表性的卵巢旁分泌、自分泌因子行RT-PCR,觀察慢性應(yīng)激是否影響這些調(diào)控卵泡發(fā)育的卵巢局部調(diào)控因子的表達。
方法:
(1)通過建立小鼠慢性應(yīng)激模型,制備卵巢HE切片觀察慢性應(yīng)激對卵泡發(fā)育的影響。
(2)從慢性應(yīng)激的第一天開始(至處死日止)取小鼠陰
2、道分泌物,作涂片,行瑞氏染色觀察其所處動情周期。
(3)通過外源性補充促性腺激素,觀察其對應(yīng)激后卵泡發(fā)育的恢復(fù)作用。
(4)采用相對定量real-time PCR方法測定GDF-9、BMP-15、bFGF、SCF這幾個代表性的卵巢旁分泌、自分泌因子的mRNA水平。
實驗結(jié)果:
(1)慢性應(yīng)激使小鼠的動情周期紊亂、間期延長。
(2)慢性應(yīng)激影響卵泡的發(fā)育及排卵的發(fā)生。<
3、br> (3)外源性補充促性腺激素不能使卵泡發(fā)育和排卵完全恢復(fù)正常。
(4)卵源性自分泌、旁分泌因子GDF-9、BMP-15的mRNA表達水平有明顯下降,而顆粒細胞源性自分泌、旁分泌因子SCF、bFGF的mRNA表達水平則無變化。
結(jié)論:
慢性應(yīng)激可以影響小鼠的動情周期,影響小鼠卵泡的發(fā)育及排卵。外源性補充促性腺激素后,慢性應(yīng)激組排卵數(shù)明顯減少,HE染色結(jié)果顯示:慢性應(yīng)激增加了卵泡的閉鎖,
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