18498.半滑舌鰨amh基因的克隆及表達分析

1、上海海洋大學碩士學位論文碩士學位論文題目：目：半滑舌鰨半滑舌鰨AMH基因的克隆及表達分析基因的克隆及表達分析英文題目：英文題目：Antimullerianhmonegeneofthehalfsmoothtonguesole（Cynoglossussemilaevis）:cloningitsmRNAexpression專業(yè)：業(yè)：動物遺傳育種與繁殖研究方向：研究方向：分子遺傳育種姓名：名：劉姍姍指導教師：指導教師：陳松林二O一二年四月學校代

2、碼：10264研究生學號：M090107272上海海洋大學碩士學位論文I半滑舌鰨半滑舌鰨（Cynoglossussemilaevis）AMH基因的克隆及表達基因的克隆及表達分析分析摘要魚類性別相關(guān)基因的克隆與表達以及性別決定分子機制的研究是魚類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的需求，也是目前國際上急待攻克的重要科學問題。半滑舌鰨（Cynoglossussemilaevis）為我國特有經(jīng)濟海水魚類，市場價值極高，同時它也是目前發(fā)現(xiàn)的雌雄生長差異最大的魚類之一。

3、半滑舌鰨又是一種存在天然性逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象的雌雄異體魚類，且性別決定類型為ZW型。半滑舌鰨所具有的這些特點使其成為研究魚類性別決定機制、篩選性別（特別是雌性）特異決定基因，研究魚類性別分化和調(diào)控機制的理想材料和模型?？箍娎帐瞎芗に兀╝ntiMllerianhmone，AMH）也叫繆勒氏管抑制物（Mllerianinhibitingsubstance，MIS)是以多肽形式存在的細胞因子，屬于轉(zhuǎn)化生長因子β（TGFβ）超家族中的一員，廣泛分布于脊椎

4、動物和無脊椎動物中。AMH基因在雄性性腺分化期抑制繆勒氏管的形成，阻止雌性生殖器官的發(fā)育，而使中腎管發(fā)育成雄性生殖器官，是性別分化中的一個重要因子。自1986年Cate等首次從人類中克隆出該基因以來，一直受到極大關(guān)注。抗繆勒氏管激素基因擁有TGFβ超家族共有的標志性結(jié)構(gòu)，即具有AMHN區(qū)域及TGFβ結(jié)構(gòu)域，并且還含有該家族典型的9個保守的半胱氨酸殘基。本文以半滑舌鰨為研究對象，成功的獲得完整的AMH基因開放閱讀框（Openreading

5、frameF）、基因組及啟動子序列?；圉岮MH基因的開放閱讀框（F）長為1563bp，編碼520個氨基酸（不包括終止密碼子），擁有TGFβ超家族共有的標志性結(jié)構(gòu)。擴增得到的基因組序列大小為2855bp，通過與開放閱讀框cDNA序列比對，發(fā)現(xiàn)半滑舌鰨AMH基因含有7個外顯子和6個內(nèi)含子，與奧里亞羅非魚和斑馬魚的AMH結(jié)構(gòu)相似。進化樹分析表明，與牙鲆（Paralichthysolivaceus）相似性最高為61.7%，其次為花鱸（Late