p.fluorescens和s.baltica共培養(yǎng)下生物被膜形成及互作機(jī)制研究

1、㈣㈣㈣㈣㈣Y3347089浙爐z角矢乎碩士學(xué)位論文論文題目：Pfluorescens和&baltica共培養(yǎng)下生物被膜形成及互作機(jī)制研究提交日期：2018年1月浙江工商大學(xué)碩士學(xué)位論文Pfluorescens$NSbaltica共培養(yǎng)下生物被膜形成及互作機(jī)制研究摘要自然界中大多數(shù)細(xì)菌是以生物被膜形式存在的，且往往都是由多種細(xì)菌種屬構(gòu)成。食品中有害微生物一旦形成生物被膜，將對食品質(zhì)量與安全造成嚴(yán)重威脅。熒光假單胞菌(Pseudomonas

2、fluorescens)和波羅的海希瓦氏菌(ShewaneHabaltica)是養(yǎng)殖魚類低溫貯藏中的重要腐敗菌，兩者均都具有生物被膜形成能力。研究表明，群體感應(yīng)(quorumsensing，QS)系統(tǒng)調(diào)控細(xì)菌的生物被膜形成，課題組己分離出大黃魚源PfluorescensPF07和ShewaneUabalticaSB11，其中PF07能產(chǎn)生N?；呓z氨酸內(nèi)酯(AHLs)信號分子，而Sbaltica不產(chǎn)AHLs。鑒于此，本研究比較分析5株不

3、同來源的尸fluorescens被膜形成能力、致腐表型和AHLs活性，篩選出一株強(qiáng)被膜形成能力和高AHLs活性的菌株；研究培養(yǎng)溫度(30oc，15℃和4℃、對PfluorescensPF07和SbalticaSBll單菌和混菌被膜及粘附特性的影響；構(gòu)建PF07中AHLs活性的luxI基因缺失株，比較分析luxl基因缺失對Pfluorescens單菌及混菌生物被膜形成的影響，評價A_HLs信號分子在混合被膜的種間相互作用。主要結(jié)果如下：本

4、研究首先比較分析5株P(guān)艦。陀jcP力J的生物被膜形成規(guī)律和AHLs活性。采用結(jié)晶紫法、苯酚硫酸法、珠渦流法及熒光顯微鏡觀察熒光假單胞菌的生物被膜形成和粘附能力，并測定細(xì)菌泳動性、蛋白酶活性、嗜鐵素和AHLs等活性。結(jié)果表明，五株熒光假單胞菌在309CLB肉湯中生長良好，經(jīng)24h培養(yǎng)后氣一液界面上出現(xiàn)較厚的膜，在微孑L板中生物被膜形成較快，其中魚源PF01、PF06、PF07和PFl0分離株在12h含量最高，而標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)F。k4在18h最