抗氧化劑對(duì)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物引起的雞胚肝細(xì)胞毒性的緩解作用.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文抗氧化劑對(duì)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物引起的雞胚肝細(xì)胞毒性的緩解作用姓名：周彩琴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張才喬20050501周彩琴浙江人學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要近50年來(lái)，隨著工業(yè)、農(nóng)業(yè)的飛速發(fā)展，大量的化學(xué)合成物質(zhì)伴隨現(xiàn)代化的生產(chǎn)流程及其副產(chǎn)物被釋放到了環(huán)境中。其中有一些結(jié)構(gòu)類似動(dòng)物和人體內(nèi)激素，能于擾體內(nèi)天然激素正常的合成、分泌、利用、作用和代謝，這些化學(xué)物質(zhì)被稱為內(nèi)分泌干擾物(EDC)。作為EDC的代表

2、物多氯聯(lián)苯(polychlorinatedbiphenyl，PCB)作為一種難分解的人工合成化合物，在環(huán)境中的殘留很難降解且極易通過(guò)生物積累給動(dòng)物和人帶來(lái)極大的危害。歷史上多次爆發(fā)的PCB污染事件嚴(yán)重影響了家禽養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)發(fā)展。雞場(chǎng)發(fā)生PCB污染事件后都不同程度引起雞腹水癥、孵化率降低、蛋殼變薄、產(chǎn)蛋量下降、肝臟損傷、免疫力下降及生殖系統(tǒng)的損壞等。同時(shí)可引起肝臟形態(tài)和功能的損傷，但具體機(jī)制了解甚少。本實(shí)驗(yàn)選用雞胚肝臟組織作為肝細(xì)胞的供體，

3、采用體外實(shí)驗(yàn)來(lái)研究PCB對(duì)雞胚肝細(xì)胞的作用機(jī)制，并探討具有抗氧化性的外源添加物槲皮素和維生素E、C和A能否緩解或抑制PCB對(duì)肝細(xì)胞的損傷作用。本實(shí)驗(yàn)建立14日齡雞肝細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)模型。新鮮分離的單個(gè)肝細(xì)胞呈圓形、透亮并有立體感：培養(yǎng)3～4h后大部分細(xì)胞開(kāi)始貼壁生長(zhǎng)：繼續(xù)培養(yǎng)出現(xiàn)不同程度地由圓形轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘟切?，胞體變平變薄，體積明顯增大，細(xì)胞間開(kāi)始出現(xiàn)片狀連接。細(xì)胞角蛋白(cK)和胰島素樣生長(zhǎng)因子I(IGFI)增殖形態(tài)學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)分離培養(yǎng)的

4、大部分細(xì)胞為肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。MTl’比色法測(cè)定結(jié)果顯示肝細(xì)胞在添加了促生長(zhǎng)物質(zhì)的M199培養(yǎng)液培養(yǎng)下能保持良好的增殖活性。利用此培養(yǎng)模型來(lái)評(píng)價(jià)肝細(xì)胞對(duì)PCB的敏感性及PCB對(duì)其體外增殖的影響。用PCB的工業(yè)混合物Aroclor1254(A1254，001～10Itg／mL)處理肝細(xì)胞，通過(guò)形態(tài)觀察和對(duì)細(xì)胞增殖活力測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)A1254處理組的肝細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)改變，胞膜粗糙，并隨著A1254作用劑量的增加，細(xì)胞膜破裂程度加重，有較多細(xì)