抗氧化劑對環(huán)境內(nèi)分泌干擾物引起的雞胚肝細胞毒性的緩解作用.pdf

1、浙江大學碩士學位論文抗氧化劑對環(huán)境內(nèi)分泌干擾物引起的雞胚肝細胞毒性的緩解作用姓名：周彩琴申請學位級別：碩士專業(yè)：基礎(chǔ)獸醫(yī)學指導(dǎo)教師：張才喬20050501周彩琴浙江人學碩士學位論文中文摘要近50年來，隨著工業(yè)、農(nóng)業(yè)的飛速發(fā)展，大量的化學合成物質(zhì)伴隨現(xiàn)代化的生產(chǎn)流程及其副產(chǎn)物被釋放到了環(huán)境中。其中有一些結(jié)構(gòu)類似動物和人體內(nèi)激素，能于擾體內(nèi)天然激素正常的合成、分泌、利用、作用和代謝，這些化學物質(zhì)被稱為內(nèi)分泌干擾物(EDC)。作為EDC的代表

2、物多氯聯(lián)苯(polychlorinatedbiphenyl，PCB)作為一種難分解的人工合成化合物，在環(huán)境中的殘留很難降解且極易通過生物積累給動物和人帶來極大的危害。歷史上多次爆發(fā)的PCB污染事件嚴重影響了家禽養(yǎng)殖的經(jīng)濟發(fā)展。雞場發(fā)生PCB污染事件后都不同程度引起雞腹水癥、孵化率降低、蛋殼變薄、產(chǎn)蛋量下降、肝臟損傷、免疫力下降及生殖系統(tǒng)的損壞等。同時可引起肝臟形態(tài)和功能的損傷，但具體機制了解甚少。本實驗選用雞胚肝臟組織作為肝細胞的供體，

3、采用體外實驗來研究PCB對雞胚肝細胞的作用機制，并探討具有抗氧化性的外源添加物槲皮素和維生素E、C和A能否緩解或抑制PCB對肝細胞的損傷作用。本實驗建立14日齡雞肝細胞無血清培養(yǎng)模型。新鮮分離的單個肝細胞呈圓形、透亮并有立體感：培養(yǎng)3～4h后大部分細胞開始貼壁生長：繼續(xù)培養(yǎng)出現(xiàn)不同程度地由圓形轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘟切?，胞體變平變薄，體積明顯增大，細胞間開始出現(xiàn)片狀連接。細胞角蛋白(cK)和胰島素樣生長因子I(IGFI)增殖形態(tài)學鑒定，發(fā)現(xiàn)分離培養(yǎng)的

4、大部分細胞為肝實質(zhì)細胞。MTl’比色法測定結(jié)果顯示肝細胞在添加了促生長物質(zhì)的M199培養(yǎng)液培養(yǎng)下能保持良好的增殖活性。利用此培養(yǎng)模型來評價肝細胞對PCB的敏感性及PCB對其體外增殖的影響。用PCB的工業(yè)混合物Aroclor1254(A1254，001～10Itg／mL)處理肝細胞，通過形態(tài)觀察和對細胞增殖活力測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)A1254處理組的肝細胞出現(xiàn)形態(tài)改變，胞膜粗糙，并隨著A1254作用劑量的增加，細胞膜破裂程度加重，有較多細