12251.鼠李糖乳桿菌脅迫應(yīng)答機制的研究

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為()課題(組)的研究成果，獲得()課題(組)經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在()實驗室完成。(請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負責(zé)人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽名)：醐釩、。m

2、年5月習(xí)日摘要摘要近年來，隨著乳酸菌的特殊生理活性和營養(yǎng)功能被不斷發(fā)現(xiàn)，有關(guān)乳酸菌的研究愈受到重視。鼠李糖乳桿菌作為最常見并被廣泛應(yīng)用的模式益生菌，研究其受環(huán)境的應(yīng)激能力將對益生菌工業(yè)應(yīng)用及發(fā)揮其性能具有指導(dǎo)意義。本研究首先從臺灣的益生產(chǎn)品中篩選出一株鼠李糖乳桿菌(三口c，06口c砒船砌口m加s淞zY)以進一步開展其生長及功能研究。盡管過去對乳酸菌的生產(chǎn)研究都集中在發(fā)展具有低成本效益的經(jīng)濟型培養(yǎng)基，但deM礬R090saandSl翻印e

3、(MRs)培養(yǎng)基仍然是最被廣泛應(yīng)用的商業(yè)化培養(yǎng)基。本研究通過L27正交實驗設(shè)計及分析了MRs培養(yǎng)基中十種成分的影響。結(jié)果得出十種成分對鼠李糖乳桿菌生物量的影響排序為：葡萄糖MIls04H20牛肉汁CH3C00NaM簽04酵母提取物月示蛋白胨K2HP04檸檬酸銨吐溫80。雖然統(tǒng)計分析結(jié)果表明檸檬酸銨，K2HP04，CH3COONa和M簽04等微量元素對生物的生長影響不顯著，但后續(xù)發(fā)現(xiàn)微量元素的總消除顯著影響乳酸菌的細胞生長。通過傅里葉變換

4、紅外(FⅡR)、蛋白質(zhì)電泳(SDS—PAGE)和串聯(lián)式質(zhì)譜mDIToFMS血“S)等分析對不同培養(yǎng)條件下的細胞做進一步的表征，結(jié)果顯示葡萄糖作為主要碳源在培養(yǎng)基支撐生物生長過程中扮演了至關(guān)重要的角色。隨后探索了不同金屬離子脅迫下鼠李糖乳桿菌ZY的細胞生長、生理和蛋白組變化。通過透射電子顯微鏡(TE峋觀察細胞形態(tài)、電勢分析(殘tapotemjal)理清細胞表面屬性、SDS—PAGE和串聯(lián)MSMS探索細胞蛋白質(zhì)組等結(jié)果闡明金屬離子的脅迫機制

5、。研究結(jié)果表明，金屬鈣明顯刺激鼠李糖乳桿菌zY的生長，并導(dǎo)致細胞的形態(tài)由長鏈狀轉(zhuǎn)變?yōu)槎替湥瑫r引發(fā)了細胞內(nèi)chaperonillGroEL的超表達。此外，后續(xù)對鈣脅迫后鼠李糖乳桿菌耐酸性、口腔定殖能力、熱應(yīng)力和冷應(yīng)激等的研究表明鈣離子在乳酸菌的科學(xué)研究及工業(yè)應(yīng)用上具有廣大的發(fā)展前景。最后本文研究了鼠李糖乳桿菌在乙醇與鈣的復(fù)合脅迫下生長、生理和蛋白質(zhì)組等方面的反應(yīng)。研究所用脅迫策略為將鼠李糖乳桿菌置于添加不同脅迫因素的MRs培養(yǎng)基中：(i