14072.斜紋夜蛾蛻皮激素受體(ecrusp)與熱激蛋白分子70(hsphsc70)相互作用研究_第1頁
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1、華南師范大學碩士學位論文斜紋夜蛾蛻皮激素受體(EcR/USP)與熱激蛋白分子70(Hsp/HscTO)相互作用研究學位申請人:指導教師:專業(yè):院系:論文提交日期:龔艷君黃立華副教授生物化學與分子生物學生命科學學院2013一0531摘要斜紋夜蛾蛻皮激素受體(Ec剛USP)與熱激蛋白分子70(Hsp/Hsc70)相互作用研究專業(yè)名稱:生物化學與分子生物學申請人:龔艷君導師姓名:黃立華摘要蛻皮激素受體二聚體(Ec舢SP)在昆蟲變態(tài)發(fā)育過程中起

2、著至關重要的調控作用。研究表明EcR/USP只有與熱激蛋白(Heatshockprotein,Hsp)分予伴侶作用以后才能獲得DNA結合能力,參與其它基因的轉錄調控。為了明確EcR/USP與HSP/HSC70問的蛋白相互作用,我們以一種重要蔬菜害蟲——斜紋夜蛾為研究對象,利用COIP和LC/MS的方法發(fā)現HSP/HSC70與Ec蝴cRBl之間存在蛋白相互作用。為進一步明確兩兩間的蛋白互作關系,。我們利用原核細胞分別表達了EcRA、EcR

3、Bl、USPl、USP2的融合蛋白,采用Pulldown、Westernblot、Farwestem等方法發(fā)現HSP70和HSC70能夠分別與EcRA、EcRB1、USPl和USP2產生蛋白質相互作用。為進一步探究這種蛋白質互作對Ec舢SP功能的影響,我們采用細胞轉染和免疫組化的方法,應用激光共聚焦顯微鏡研究了這些蛋白質在『F常情況以及在20E誘導情況下的亞細胞定位情況。結果表明,正常情況下,Hsp70主要定位于細胞質中,而EcRBl、

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