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1、HSP70是一類(lèi)ATP依賴(lài)的分子伴侶,分子量約為70kDa。用腫瘤組織中提取的HSP70對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,可以預(yù)防相應(yīng)腫瘤的發(fā)生和生長(zhǎng)。最近的研究表明HSP70攜帶的小肽及其ATPase結(jié)構(gòu)域是HSP70抽提物激活腫瘤特異性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵。根據(jù)這些發(fā)現(xiàn),我們推測(cè)腫瘤相關(guān)性抗原蛋白和HSP70的融合蛋白能用于免疫治療,激活機(jī)體抗原特異性免疫反應(yīng),抑制腫瘤生長(zhǎng)。本論文的工作針對(duì)以HSP70為基礎(chǔ)的融合蛋白進(jìn)行了一系列的抗腫瘤研究。 在
2、第一章中,我們構(gòu)建了包含HSP70家族中組成型表達(dá)的Hsc70蛋白N端ATPase結(jié)構(gòu)域(Hsc70NTD)和B16腫瘤相關(guān)性抗原TRP2的融合蛋白,并利用分子篩層析的方法解決了包涵體的復(fù)性問(wèn)題。融合蛋白的復(fù)性情況可以通過(guò)其ATPase活性得以測(cè)定。用融合蛋白免疫小鼠后,在其體內(nèi)檢測(cè)到了TRP2特異性淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng),而且對(duì)免疫后的小鼠進(jìn)行B16腫瘤接種實(shí)驗(yàn),腫瘤的生長(zhǎng)明顯受到抑制。 在第二章中,我們將腫瘤相關(guān)性抗原TRP2與全
3、長(zhǎng)HSP70融合,發(fā)現(xiàn)融合蛋白Hsp70-TRP2的免疫效果優(yōu)于只含有HSP70的N端ATPase結(jié)構(gòu)域的融合蛋白Hsp70NTD-TRP2。我們認(rèn)為Hsp70融合腫瘤相關(guān)性抗原的抗腫瘤的過(guò)程,包含抗原依賴(lài)性的CTL誘導(dǎo)和非抗原依賴(lài)性的免疫反應(yīng)的活化兩種不同的機(jī)制。在第三章中,我們構(gòu)建了四種融合B16相關(guān)性抗原的HSP70融合蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行聯(lián)合免疫,發(fā)現(xiàn)相比于單一種類(lèi)的HSP70融合蛋白,多種HSP70融合蛋白聯(lián)合免疫可以避免腫瘤細(xì)胞因
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