16553.家蠅外切多聚磷酸酶(ppx)片段基因的克隆及原核表達載體構建

1、1中國圖書分類號:Q7單位代碼：10660學號：S100039貴陽醫(yī)學院貴陽醫(yī)學院20132013碩士學位論文碩士學位論文家蠅家蠅外切多聚磷酸酶外切多聚磷酸酶(PPX)(PPX)片段基因的克隆片段基因的克隆及原核表達載體構建及原核表達載體構建研究生：楊虓導師：張春林（教授）吳建偉（教授）年級：2010級專業(yè)：細胞生物學2013年03月09日3家蠅外切多聚磷酸酶家蠅外切多聚磷酸酶(PPX)(PPX)片段基因的克隆及原核表達載體構建片段基因

2、的克隆及原核表達載體構建專業(yè)名稱：細胞生物學研究生：楊虓導師：張春林教授吳建偉教授摘要：目的：摘要：目的：克隆家蠅外切多聚磷酸酶（PPX）片段基因的cDNA序列，并對PPX基因進行生物信息學分析，構建該基因的原核表達載體。方法：方法：根據(jù)已知抗菌肽N端氨基酸序列設計簡并引物，采用3’race技術對其進行序列延伸；根據(jù)3’race結果設計引物，擴增家蠅PPX基因序列并對其進行生物信息學分析，構建家蠅PPX基因重組原核表達質(zhì)粒并鑒定。結果：

3、結果：家蠅PPX基因的cDNA長660bp，編碼219個氨基酸。生物信息學分析顯示家蠅PPX是一個分子量24.7867kD，等電點為8.4，不穩(wěn)定參數(shù)45.58，脂溶指數(shù)99.27，不具跨膜區(qū)和信號肽的親水蛋白。其主要構成元件為α螺旋、β折疊和無規(guī)則卷曲及少部分的β轉角。三維結構預測顯示該蛋白高度復雜卷曲。系統(tǒng)同源性分析顯示PPX基因在進化過程中高度保守。根據(jù)克隆的家蠅PPX基因成功構建PPX基因的原核表達載體，獲得融合組氨酸（HIS）