16713.脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)方法的建立及其應(yīng)用研究

1、U“rsityofS‘ndTechnolog)ofChinaUniversityotcIenceandeCl3noloqyOt11naAdissertationformaster’SdegreeAThesisonLipidomicsStudy：Establishmentofthetechnique&methodforlipidc“anditsApplicati婦omicsanitsllCatlonlAuthor’SName：Specia

2、lity：Supervisor：Finishedtime：JiaojiaoMaOaCellBiologyProfFuquanYangSeptember30，2012摘要摘要脂質(zhì)組學(xué)就是對(duì)細(xì)胞、組織、生物體中的脂質(zhì)組成、含量，以及與其相互作用的分子進(jìn)行全面系統(tǒng)的分析和鑒定，了解脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，進(jìn)而揭示脂質(zhì)代謝與細(xì)胞、器官乃至機(jī)體的生理、病理過(guò)程之間的關(guān)系的一門學(xué)科。脂質(zhì)有許多重要的生物學(xué)功能，對(duì)其進(jìn)行研究的脂質(zhì)組學(xué)作為代謝組學(xué)的一個(gè)分支

3、，受到越來(lái)越多的關(guān)注。脂質(zhì)組學(xué)的快速發(fā)展主要是得益于現(xiàn)代分離技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù)等分析鑒定技術(shù)日趨成熟，從而使我們可以對(duì)生物樣品中的脂質(zhì)進(jìn)行全面的定性和定量分析。本文第一章對(duì)脂質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，介紹了常用的脂質(zhì)檢測(cè)分析方法和質(zhì)譜的基本原理。第二章介紹了人血漿脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)方法的初步建立。對(duì)現(xiàn)有的兩種脂質(zhì)提取的溶劑體系進(jìn)行了進(jìn)一步分析比較，最后經(jīng)綜合考慮選定甲基叔丁基醚(MTBE)／甲醇體系作為以后脂質(zhì)提取的方法。論文第三章在之前實(shí)驗(yàn)的基

4、礎(chǔ)上系統(tǒng)開展了對(duì)模式生物線蟲脂質(zhì)組學(xué)的研究，包括定性和定量?jī)蓚€(gè)方面的分析。秀麗隱桿線蟲是生物研究中一種非常理想的模式生物，尤其是在發(fā)育、遺傳學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、老化等領(lǐng)域。脂質(zhì)組的定性、定量分析有助于促進(jìn)從功能基因組學(xué)的角度研究線蟲的代謝途徑。本章介紹了用MTBE／甲醇提取方法，使用TSQ通過(guò)前體離子和中性丟失掃描模式對(duì)N2和eat一2兩種線蟲的脂質(zhì)組進(jìn)行分析，用LipidXplorerVl23對(duì)得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。最后共鑒定

5、到磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰膽堿(LPC)等12類脂質(zhì)，其中N2鑒定到318個(gè)，eat一2鑒定到317個(gè)脂質(zhì)分子，對(duì)其中的一些脂質(zhì)進(jìn)行了定量的分析，并在此基礎(chǔ)上系統(tǒng)的比較了兩種線蟲的脂質(zhì)組成，找到了一些有差異的脂質(zhì)分子。在對(duì)線蟲的脂質(zhì)組進(jìn)行全面分析的同時(shí)，我們也基本上完成了脂質(zhì)分析方法的建立。本文的研究目標(biāo)是建立一個(gè)包括鳥槍法脂質(zhì)組學(xué)和定向串聯(lián)質(zhì)譜(MS／MS)的高通量的分析方法，可以對(duì)線蟲中的脂質(zhì)分子進(jìn)行全面