17206.基于兩種熒光探針研究乙酰膽堿脂酶的活性及其抑制作用

1、分類號學(xué)校代碼066110542密級學(xué)號201202120964基于兩種熒光探針研究乙酰膽堿酯酶的活性及其抑制作用Studyontheactivityofacetylcholinesteraseanditsinhibitionbasedonthetwokindsoffluorescenceprobe指導(dǎo)教師姓名、職稱鲞塞至耋絲湖南師范大學(xué)學(xué)位評定委員會(huì)辦公室二零一五年五月和靈敏度。2)因?yàn)檗r(nóng)藥抑制AChE的活性，利用上述探針BN，實(shí)現(xiàn)超

2、靈敏熒光檢測農(nóng)藥。實(shí)驗(yàn)中乙酰膽堿酯酶催化乙酰膽堿產(chǎn)生膽堿，膽堿被膽堿氧化酶氧化生成雙氧水，雙氧水與探針結(jié)合生成熒光類產(chǎn)物ON。當(dāng)加入農(nóng)藥時(shí)，乙酰膽堿酯酶的活性被抑制，使酶產(chǎn)生的雙氧水減少，引起少量的熒光增強(qiáng)。通過檢測BN的熒光變化，農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制被檢測。實(shí)驗(yàn)表明，農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制率與農(nóng)藥濃度的對數(shù)成正比。通過研究農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的抑制，本論文實(shí)現(xiàn)了對甲拌磷，甲基對硫磷和乙酰甲胺磷的高靈敏度檢測，其檢測限分別為2311

3、0～，34610一，99210～g／L。本實(shí)驗(yàn)提供了一種新的靈敏檢測農(nóng)藥的方法，該方法對農(nóng)藥殘留的研究應(yīng)用具有廣闊前景。3)提出了一種新型的高效檢測有機(jī)磷農(nóng)藥的方法。本文合成了一種新型的硝基探針，此探針對巰基類物質(zhì)有良好的響應(yīng)?；谟袡C(jī)磷農(nóng)藥能夠抑制乙酰膽堿酯酶的活性，有效阻礙乙酰膽堿酯酶對硫代乙酰膽堿的水解，從而產(chǎn)生少量的硫代膽堿。產(chǎn)生的硫代膽堿能使此硝基探針的熒光增加，熒光強(qiáng)度的變化與農(nóng)藥含量成反比關(guān)系。運(yùn)用此方法，我們成功檢測了甲