版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、在建立了小黑楊花粉植株再生優(yōu)化組培體系:分化培養(yǎng)基為MH+BA0.1 mg/L+NAA0.05mg/L,生根培養(yǎng)基為MH+IBA0.4mg/L的基礎(chǔ)上進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化.確定農(nóng)桿菌介導(dǎo)的小黑楊遺傳轉(zhuǎn)化體系:在上述分化培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化;葉片預(yù)培養(yǎng)2~3d后,進(jìn)行侵染;工程菌液OD600=0.3~0.5,浸泡時(shí)間為5min,25℃,置暗處共培養(yǎng)2~4d;轉(zhuǎn)入含卡那霉素濃度為40mg/L的選擇培養(yǎng)基上,進(jìn)行選擇培養(yǎng),同時(shí)用濃度
2、700mg/L的頭孢唑林鈉對(duì)葉片進(jìn)行脫菌;得到卡那霉素抗性芽后,在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)(含有40mg/L卡那霉素,700mg/L頭孢唑林鈉).在建立小黑楊花粉植株遺傳轉(zhuǎn)化體系基礎(chǔ)上,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法向小黑楊植株基因組中導(dǎo)入抗蟲基因(蜘蛛殺蟲肽與Bt基因C末端肽序列連接在一起表達(dá)的一種融合蛋白基因),獲得3個(gè)轉(zhuǎn)化無性系,轉(zhuǎn)化率為0.62﹪,GUS表達(dá)陽性率為75﹪,并對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)檢測和飼蟲試驗(yàn).卡那霉素抗性植株的分子生物學(xué)檢測表
3、明,PCR檢測陽性率均為100﹪,Southern斑點(diǎn)雜交陽性率34﹪,轉(zhuǎn)基因植株目的基因的PCR-Southern雜交陽性率為1 00﹪.說明外源基因已穩(wěn)定整合到小黑楊花粉基因組中.轉(zhuǎn)基因小黑楊的蟲飼試驗(yàn)表明,接舞毒蛾2齡幼蟲,殺蟲率達(dá)62.5﹪~92.5﹪,陰性對(duì)照植株蟲飼死亡率5﹪~13.3﹪,陽性植株飼喂舞毒蛾死亡率高于陰性對(duì)照植株飼喂舞毒蛾死亡率,而且集中在飼蟲初期,說明基因表達(dá)產(chǎn)物水平較高.咬食轉(zhuǎn)基因植株的尚存活舞毒蛾平均蟲
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 轉(zhuǎn)Lea基因小黑楊花粉植株抗旱、耐鹽性分析.pdf
- 小黑楊花粉植株葉綠體蛋白質(zhì)組的鑒定與分析.pdf
- 雙耐鹽基因載體的構(gòu)建和小黑楊花粉植株組培系統(tǒng)的優(yōu)化.pdf
- 轉(zhuǎn)雙元基因單倍體小黑楊的抗蟲性研究.pdf
- 白樺抗蟲基因遺傳轉(zhuǎn)化研究及轉(zhuǎn)基因植株的抗蟲性.pdf
- 轉(zhuǎn)抗蟲基因741楊的抗蟲規(guī)律性及抗蟲機(jī)理研究.pdf
- 花粉介導(dǎo)法獲得轉(zhuǎn)耐鹽基因AhCMO玉米植株的研究.pdf
- 山楊轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因的研究.pdf
- 轉(zhuǎn)Bt基因甘藍(lán)的抗蟲性研究.pdf
- 農(nóng)桿菌介導(dǎo)獲得可去除選擇標(biāo)記的轉(zhuǎn)CpTI抗蟲基因玉米植株.pdf
- 轉(zhuǎn)抗蟲基因小黑楊根系分泌物對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響.pdf
- 轉(zhuǎn)抗蟲基因(BtCry3A)741楊抗蟲性研究.pdf
- 轉(zhuǎn)CryIAc和CpTi基因水稻抗蟲性比較及高羊茅植株再生.pdf
- 玉米自交系農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系的建立及轉(zhuǎn)抗蟲基因玉米植株的獲得.pdf
- 轉(zhuǎn)Bt crylAh和crylIe基因抗蟲玉米的研究.pdf
- 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉抗蟲性鑒定方法研究.pdf
- 農(nóng)桿菌介導(dǎo)芝麻轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因的研究.pdf
- 轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因棉花的獲得、檢測和基因表達(dá)研究.pdf
- 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲玉米對(duì)天敵昆蟲的影響.pdf
- 可去除選擇標(biāo)記的轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲玉米的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論