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1、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文泛素化和去泛素化調(diào)控RELA的轉(zhuǎn)錄活性姓名:范義輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:傅松濱20100501泛素化和去泛素化調(diào)控RELA的轉(zhuǎn)錄活性UbiquitinationandDeUbiquitinationcontrolRELAtranscriptionalactivityAbstraetObjective:Ubiquitination—mediateddegradationofI沁lAsubunit
2、ofNFrBiscriticalfortheterminationofNF—rd3activationHowevertheprecisemechanismfortheubiquitinationofRelAisstillnotfullyunderstoodMethods:WeUSePCRtomutatealllysinesitesatRELAReporterassaywasusedtoanalyzeallthemutantsWB,Rea
3、lTimePCRandELISAwereusedtoinvestigatethebiologicfunctionResults:HerewereportthatTNFainducesRelApolyubiquitinationatthelysine195residueandthisubiquitinationeventiscriticalforthedegradationofRelAandterminationofTNFamediate
4、dNFrBactivationOverexpressionofRelAmutantwitllanargininesubstitutionoflysine195residuedramaticallyinhibitsI沁lApolyubiquitinationandinducesastrongerNF—rBactivationcomparedtothewild—typeReconstitutionofRelA—deficientMEFcel
5、ls、7l,ithRelAwildtypeandamutantcontaininglysine195toargininemutationrevealedtheimportanceofthissiteinTNFa—mediatedRelApolyubiquitinationdegradationandattenuationofNFrd3activationOurfmdingisthefirStreportthatsubstitutiono
6、fakeyRelAlysineresiduewitharginineinhibitsTNFctinducedRelAubiquitinationandenhancesTNFe—inducedNF一1出activationTodissectthede—ubiquitinationpathwayofRELA,wescreentheUSPsexpressionlibraryOurresultsshowthatUSP19Cande—ubiqui
7、finateRELAandenhanceRELAtranscriptionalactivityFurthermoreUSP19bindswithRELATakentheresultstogetherUbiquitinationandDeUbiquitinationcontrolRELAtranscriptionalactivityConclusion:InthisstudywefindthatTNFainduceRELApolyubiq
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