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文檔簡(jiǎn)介
1、試驗(yàn)采用BHK<,21>細(xì)胞增殖口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV),經(jīng)PEG-6000沉淀、差速離心和蔗糖密度梯度離心等方法提純FMDV 146S,免疫動(dòng)物,制備抗血清;通過(guò)飽和硫酸銨粗提、sephadex G-25除鹽、DEAE-纖維素柱層析等提取IgG,包被滅菌的Eppendorf管捕獲病毒;在FMDV的核苷酸序列相對(duì)保守區(qū)設(shè)計(jì)上下游引物FM1/FM4,擴(kuò)增病毒的基因片段.從而建立了檢測(cè)
2、FMDV的抗原捕獲反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Antigen capture reverse transcriptase/polymerase chain reaction,AC-RT/PCR)診斷方法.經(jīng)抗體包被效果、抗原捕獲效果、抗體包被管存放期、敏感性和特異性、田間樣品的檢測(cè)等試驗(yàn),結(jié)果表明:Eppendorf管經(jīng)戊二醛固定和BSA封閉處理后可以提高抗體包被效果和捕獲抗原效果;抗體包被管放置室溫過(guò)夜或放置室溫1月后仍具有捕獲抗原的能力;
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