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1、西北大學(xué)碩士學(xué)位論文稀缺藥用植物小蔓長(zhǎng)春花產(chǎn)活性成分內(nèi)生真菌的研究姓名:孫宇宏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:殷紅20090601Abstract’Tenstrainsofendophyticfungiwereisolatedfromthestems,rootsandleavesofararemedicinalplantVincaminorLinnAccordingtothecharacteristiccolorreactio
2、nsofalkaloids,onestrain,XM—J2withtheabilitytoproducealkaloidswerescreenedoutinthepreliminaryselectionThenthestrainwasfurtherselectedbythinlayerchromatography(TLC)AndtheexperimentalresultsshowedthatXM—J2fermentationbrothe
3、xtracthasthesameRfvalueinTLCanalysisasthatofstandardvincamineBasedontheaboveexperiments,theprocedureofvincamineextractionwasoptimizedThroughsilicagelcolumnchromatography(CC),50%methanolisservedaseluentagentAfurtherUVspec
4、trometryandhigh—performanceliquidchromatography(HPLC)showedthatoneingredientoftheextractfromthestrainXM—J2hadasimilarabsorptioncurveinthewavelengthrangeof200500nmandthesameretentiontimeasvincamineThestructureofthesamplew
5、asconfirmedbyusingtheIR‘H—NMR、HHCOSYTheresultsshowedthatthesampleshouldcontainedthebioactiveingredientvincaminelikeitshostplantVincaminorUsingthebiomassandvincamineyieldasindexes,anoptimumliquidmediumpotato—sucrosemedium
6、Wasselectedout;themaximumyieldofvincamineinthismediumWas064mg‘L~Then,bychangingdifferentcarbonsource,nitrogensourceandculturetemperature,optimalcultureconditionswereselectedThesuitableconditionsforbothmycelialgrowthandvi
7、ncamineproductionare“potatosucrosemedium謝thsucrose,peptone,andthetemperatureabout28oC,respectivelyThefermentationconditionsofXMJ2werefurtherpotimizedbytheorthogonalexperimentofL16(4’)Theresultsshowedthatsucrose50g/L,pept
8、one1g/L,pHabout70andthetemperatureabout28。C,theliquidmediumquantityabout8590ml/250mlweretheoptimumconditionsforitsmycelialgrowthandweresuitableforvincamineproductionThestrainXMJ2WasclassifiedprimarilyXMJ2shouldbeastrainb
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