轉基因雞制備技術的研究.pdf

1、揚州大學碩士學位論文轉基因雞制備技術的研究姓名：何光余申請學位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導教師：李碧春孫懷昌20030501揚州大學碩士學位論文現(xiàn)腺胃腫大異常。3以人激肽釋放酶為目的基因進行胚盤注射239枚受精卵，采用蛋殼膜封口膠封口，孵出小雞14只，孵化率為59％。對孵化后47胚齡的整胚及7胚齡后死亡雞胚的肝、腦、腎、性腺、脾、心、肺、皮膚和活雞的血液皮膚進行檢測，斑點雜交陽性率為222％，對可疑陽性和出雛雞的組織器官PCR

2、檢測，陽性率為37％。其中1只1516胚齡的死胚腺胃有出血點，1只16胚齡的死胚肝臟異常腫大。出殼雛雞1只腳癱，不能直立。7只在發(fā)育到15左右千克食欲減退廢絕。消瘦而死，解剖發(fā)現(xiàn)膽囊腫大，肝腸部分發(fā)綠壞死。這可能與早期試驗飼養(yǎng)狀況不好有關，而且對試驗雞未進行剖檢分析不能排除疾病的可能性。但也從另一方面說明胚盤顯微注射法制備轉基因雞，外源基因的隨機插入可能導致內源性基因的破壞或失活，也可能激活正常情況下處于關閉狀態(tài)的基因或在插入位點發(fā)生染

3、色體的畸變而引起個體異常。實驗結果表明hGH、Klkl兩種基因均可在雞中獲得整合表達，也說明在一定的范圍內，不同質粒，不同片段大小的外源基因通過脂質體包埋，利用胚盤顯微注射法均可獲得轉基因雞，胚盤顯微注射法是轉基因雞制各的一條有效途徑。4在用精子介導法進行雞的轉基因研究中對雞精子的采集、稀釋、體外培養(yǎng)和基因轉染的條件進行了摸索，轉染后的精子活力與對照組差別不顯著，PCR檢測結果證明3TC孵育1小時，精子活力良好并攜帶有外源基因。以人激肽