豬繁殖與呼吸綜合征病毒CH-1a株基因組解析及其囊膜蛋白結(jié)構(gòu)與功能分析.pdf

1、1995年,中國(guó)首次在北京地區(qū)大規(guī)模爆發(fā)PRRS,隨后從流產(chǎn)胎兒體內(nèi)分離出一株P(guān)RRSV,命名為CH-1a株.為了弄清流行于中國(guó)豬群的PRRSV的來源和遺傳學(xué)背景,并為進(jìn)一步研究疫苗防制此病提供依據(jù),該文測(cè)定了中國(guó)分離的第一株P(guān)RRSVCH-1a株的基因組全序列,利用序列分析軟件對(duì)各基因和非編碼區(qū)進(jìn)行了分析,并與歐美標(biāo)準(zhǔn)毒株作了比較,繪制了其系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹.囊膜蛋白GP5是PRRSV的主要結(jié)構(gòu)蛋白和免疫保護(hù)性抗原之一,有許多獨(dú)特的生物學(xué)

2、和免疫學(xué)功能,在致病和免疫學(xué)功能,在致病和免疫機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用.鑒于此,我們隨后用真核表達(dá)系統(tǒng)對(duì)之進(jìn)行了體外表達(dá),并對(duì)其功能作了初步探討.為了分析該基因功能和研制PRRS基因疫苗,該文將PRRSVCH-1a株ORF5亞克隆至真核表達(dá)載體pCR3-Uni的CMV啟動(dòng)子下游,構(gòu)建成真核表達(dá)質(zhì)粒.以該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MARC-145細(xì)胞,可誘導(dǎo)其發(fā)生以DNA斷裂和核小體形成為特征的細(xì)胞凋亡,同時(shí)證實(shí)用ORF5基因免疫接種小鼠可誘導(dǎo)其產(chǎn)生特異性抗