版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究孕酮對(duì)蛋殼鈣化初期與鈣沉積相關(guān)的基質(zhì)蛋白和基因表達(dá)的影響,初步探討鈣化起始時(shí)的鈣沉積機(jī)制。
方法:本研究以產(chǎn)蛋高峰期蛋雞作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,體外培養(yǎng)蛋雞子宮內(nèi)膜細(xì)胞,測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,檢測(cè)不同濃度的激素對(duì)細(xì)胞體外增殖和鈣離子濃度的影響,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(RTQ-PCR)檢測(cè)不同處理組細(xì)胞中Cabp-d28k、Ca2+-ATPase、碳酸酐酶(CA)、TRPV6、骨橋蛋白(OPN)、卵鐵傳遞蛋白(Ovotrans
2、ferrin)、卵清蛋白(Ovalbumin)、Ovocleidin17和凝集素(Clusterin)等基因的表達(dá)量變化。在此基礎(chǔ)上對(duì)蛋雞進(jìn)行孕酮和孕酮受體拮抗劑處理,蛋殼鈣化初期(排卵后4.5-5.5 h)采集子宮組織和蛋殼,掃描電子顯微鏡(SEM)觀察蛋殼超微結(jié)構(gòu)變化,測(cè)定子宮中鈣離子濃度及相關(guān)基因表達(dá)量的變化規(guī)律,對(duì)基因的表達(dá)量變化與超微結(jié)構(gòu)的相關(guān)性進(jìn)行分析,并采用免疫組化和免疫印跡(Western-Blotting)分析Cabp
3、-d28k和Ovalbumin蛋白在子宮中的變化。
結(jié)果:本研究成功培養(yǎng)了蛋雞子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞,并測(cè)得兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線;添加100 nM的孕酮能顯著(P<0.05)促進(jìn)上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的體外增殖;激素對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞中鈣離子濃度的影響不顯著(P>0.05),但雞體經(jīng)孕酮處理后子宮組織中的鈣離子含量顯著(P<0.05)下降。不同處理對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞和子宮組織中基因的表達(dá)量影響為:孕酮處理后Cabp-d28k、CA和O
4、PN mRNA在子宮中的表達(dá)量顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)下降,OVA、Clu和OC17mRNA的表達(dá)量顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)升高;孕酮受體拮抗劑處理后TRPV6 mRNA的表達(dá)量顯著(P<0.05)下降,OVA、OVO、Clu和OC17 mRNA的表達(dá)量顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)升高。與對(duì)照組和拮抗劑處理相比,孕酮處理后蛋殼內(nèi)膜層和乳突層變厚,纖維直徑和結(jié)節(jié)直徑變大,乳突間隙和纖
5、維間隙變小,差異均達(dá)到顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)水平,且孕酮處理后Cabp-d28k、OVA、OVO以及OPN等基因的表達(dá)量變化與蛋殼超微結(jié)構(gòu)有相關(guān)性;免疫組化和Western Blotting分析結(jié)果表明,Cabp-d28k和Ovalbumin蛋白在不同處理組的子宮中均有表達(dá),但Cabp-d28k蛋白在孕酮處理組中的表達(dá)量低于對(duì)照組和孕酮受體拮抗劑處理組,Ovalbumin蛋白則相反。
結(jié)論:蛋殼鈣化初期孕
6、酮顯著(P<0.05)抑制了Cabp-d28k和OPN在子宮中的表達(dá),使蛋殼的乳突面積、乳突直徑和纖維間隙減小;孕酮顯著(P<0.05)促進(jìn)了OVA和OVO的表達(dá),使蛋殼的纖維徑和結(jié)節(jié)直徑增加;且使蛋殼內(nèi)膜層厚度和乳突層厚度增加。研究認(rèn)為蛋殼鈣化初期孕酮可通過(guò)調(diào)控蛋雞子宮中與鈣化相關(guān)的基因和蛋白的表達(dá),使蛋殼纖維內(nèi)膜層和乳突層結(jié)構(gòu)更致密,排列更有序,從而使增加蛋殼強(qiáng)度。本研究為蛋殼鈣化時(shí)鈣沉積的機(jī)制的進(jìn)一步研究提供了理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 籠養(yǎng)蛋雞鈣代謝對(duì)蛋殼質(zhì)量的影響及其機(jī)制研究.pdf
- 早期子宮內(nèi)膜癌的診斷研究.pdf
- 鈣網(wǎng)蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)及臨床意義研究.pdf
- 尼古丁對(duì)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞力學(xué)特征的影響及機(jī)制研究.pdf
- 早期子宮內(nèi)膜癌最佳手術(shù)方式的研究.pdf
- 子宮內(nèi)膜肥大細(xì)胞介質(zhì)與奶牛子宮內(nèi)膜炎關(guān)系的研究.pdf
- 早期子宮內(nèi)膜癌預(yù)后因素分析.pdf
- 早期子宮內(nèi)膜癌微創(chuàng)治療及隨訪研究.pdf
- TRPV6在蛋雞不同組織的表達(dá)分布及其在蛋殼腺鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用.pdf
- 人子宮內(nèi)膜的體外構(gòu)建及Ang-(1-7)和AngⅡ?qū)ψ訉m內(nèi)膜細(xì)胞和子宮內(nèi)膜組織的影響.pdf
- SK3在早期胚胎發(fā)育、子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)及子宮內(nèi)膜癌發(fā)病中的作用研究.pdf
- 盆腔子宮內(nèi)膜異位癥對(duì)子宮內(nèi)膜容受性影響及機(jī)制的研究.pdf
- E-鈣黏蛋白低表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞遷移遷移、侵襲行為的影響及其機(jī)制的研究.pdf
- 子宮內(nèi)膜缺血在腹腔子宮內(nèi)膜異位病灶形成中作用及分子機(jī)制研究.pdf
- 干擾素-τ調(diào)節(jié)妊娠早期奶牛子宮內(nèi)膜BoLA-Ⅰ機(jī)制研究.pdf
- 小鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的初步研究.pdf
- 子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的研究進(jìn)展.pdf
- 子宮內(nèi)膜細(xì)胞取材器診斷慢性子宮內(nèi)膜炎的價(jià)值.pdf
- 豚鼠心室肌細(xì)胞興奮收縮耦聯(lián)鈣轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控機(jī)制的研究.pdf
- 赫賽汀抑制子宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細(xì)胞生長(zhǎng)及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論