中國矮生櫻組遺傳多樣性研究及歐李優(yōu)系S基因型鑒定.pdf

1、對分布于山東膠東昆崳山區(qū)的歐李、麥李及郁李3種野生櫻桃207個實(shí)生單株果實(shí)性狀的變異進(jìn)行了初步研究，并從初步篩選中得到的歐李優(yōu)異性狀植株中選取6株利用引物組合EM-PC2consFD+EM-PC3consRD進(jìn)行了S等位基因的PCR擴(kuò)增，進(jìn)行了S基因型鑒定；并把克隆的9個歐李新S基因和李屬其他的S基因根據(jù)氨基酸序列進(jìn)行系統(tǒng)樹的構(gòu)建。旨在為資源的保護(hù)與利用提供科學(xué)依據(jù)，為歐李自交不親和分子機(jī)理等研究提供基本資料，為探討桃、李、杏及櫻桃等核

2、果類果樹親緣關(guān)系進(jìn)一步從S基因方面提供分子證據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1.歐李和麥李果實(shí)成熟期主要集中在7月中、下旬，個別早熟或晚熟類型的果實(shí)成熟期分別在7月初和9月中下旬，而郁李果實(shí)成熟期主要集中在9月份，個別晚熟類型在10月下旬成熟。 2.歐李、麥李、郁李3個種果實(shí)(果核)縱徑和橫徑及果(核)形指數(shù)在種內(nèi)的變異系數(shù)均小于15％，是相對穩(wěn)定的植物學(xué)性狀。 3.歐李、麥李、郁李在單果重、果柄長度、果實(shí)Ca與可溶性固

3、形物含量在種內(nèi)不同類型間存在較大的遺傳變異，因此從野生歐李、麥李及郁李資源中進(jìn)一步選擇大果型、高Ca含量、短果柄、早熟或晚熟優(yōu)異種質(zhì)類型的潛力很大。 4.利用引物EM-PC2consFD+EM-PC3consRD對6株歐李優(yōu)選株系基因組DNA進(jìn)行了S等位基因的PCR擴(kuò)增、克隆測序。獲得了9個大小不同的S基因片段，經(jīng)BLAST分析其同源性確定為歐李的9個新S基因，分別命名為S1(266bp)、S2(371bp)、S3(309bp)

4、、S4(684bp)、S5(441bp)、S6(806bp)、S7(889bp)、S8(270bp)、S9(667bp)，GenBank中注冊號為EF569602，EF569603，EF577404，EF577405，EF595836，EF595837，EF601047、EF653137、EF653138。 5.根據(jù)S基因的鑒定結(jié)果，確定了6株歐李優(yōu)選株系的基因型，分別為：優(yōu)選1號(S8；S9)；優(yōu)選2號(S1；S2)；優(yōu)選3號

5、(S5；S7)；優(yōu)選4號(S8；S9)；優(yōu)選5號(S1；S4)；優(yōu)選6號(S3；S6)。 6.將S1～S9的DNA序列與相應(yīng)的相似性最高的序列比對，在C2和C3保守區(qū)之間都含有一個內(nèi)含子，其內(nèi)含子的5’端均為GT，3’端均為AG，而且富含AT堿基(68.2％-76.7％)，符合真核生物所有編碼蛋白質(zhì)的核結(jié)構(gòu)基因內(nèi)含子的規(guī)律；所克隆的9個S基因在內(nèi)含子長度(80～700bp)、堿基排列順序均有明顯差異。 7.對9個歐李的S