小麥及其近緣植物α-醇溶蛋白基因的克隆及功能分析.pdf

1、小麥?zhǔn)俏覈?guó)主要的糧食作物之一，其品質(zhì)受到人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。醇溶蛋白是小麥加工品質(zhì)特性的重要影響因素，主要決定面團(tuán)的延展性。本研究以六倍體小麥（Triticum aestivum L.，2n=6x=42，AABBDD）及其近緣植物栽培一粒小麥(Triticummonococcum，2n=2x=24，AA)、擬斯卑爾脫山羊草(Aegilops speltoides，2n=2x=24，SS)、粗山羊草(Aegilops tauschii，2

2、n=2x=24，DD)為材料，利用同源克隆的策略克隆了α-醇溶蛋白編碼基因并對(duì)其編碼的氨基酸序列進(jìn)行分析。隨后利用大腸桿菌大量表達(dá)α-醇溶蛋白，并將純化的蛋白添加入面粉中進(jìn)行揉混測(cè)驗(yàn)，從而確定不同α-醇溶蛋白對(duì)面粉加工品質(zhì)的影響。結(jié)果如下:
　　(1)從四種材料中共獲得了28條α-醇溶蛋白基因序列，GenBank登錄號(hào)為KC421073-KC421083，KC421091-KC421095，KJ137232-KJ137243，它們

3、的核苷酸序列長(zhǎng)度為837-945bp，可編碼279-315個(gè)氨基酸。序列分析表明，這些基因都具有α-醇溶蛋白編碼基因的典型結(jié)構(gòu)，其中，來(lái)自粗山羊草的3個(gè)基因(KC421091、KC421092、KC421093)含有奇數(shù)個(gè)半胱氨酸殘基，是由于在特征Ⅰ區(qū)發(fā)生了堿基T→C的顛換，導(dǎo)致半胱氨酸(Cys)→精氨酸(Arg)的突變。
　　(2)根據(jù)α-醇溶蛋白基因編碼的氨基酸特征，選擇來(lái)自栽培一粒小麥、擬斯卑爾脫山羊草、粗山羊草和小麥A、B