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1、以分離自酸馬奶酒中的九株乳酸菌、七株酵母菌為供試菌株,首先進行酵母菌產(chǎn)蛋白酶的定性及定量實驗,然后將乳酸菌、酵母菌活化連續(xù)培養(yǎng)三代后,按10%的接種量接入滅菌復合飼料中發(fā)酵,分別以37℃和28℃培養(yǎng)3d,以發(fā)酵飼料的活菌數(shù)、pH值、乳酸度及干物質(zhì)回收率為指標,篩選出發(fā)酵飼料優(yōu)良的菌株。結(jié)果表明:發(fā)酵飼料優(yōu)良的菌株為乳酸菌株1-3、5-1-1和酵母菌株J2、J20。主要指標為乳酸菌1-3、5-1-1發(fā)酵飼料pH值分別達到4.95±0.07
2、和5.02±0.03;酵母菌J2、J20發(fā)酵飼料活菌數(shù)分別為1.2×109CFU/g和1.1×109CFU/g。
其次對篩選出的優(yōu)良菌株進行馴化,分別用固體、半固體、液體馴化的方法進行。試驗結(jié)果顯示:液體馴化對四株菌種的馴化效果明顯,馴化后乳酸菌1-3發(fā)酵飼料的pH值為4.89±0.05,乳酸菌5-1-1發(fā)酵飼料的pH值為4.99±0.06;酵母菌J2發(fā)酵飼料的活菌數(shù)達1.3×109CFU/g,酵母菌J20發(fā)酵飼料的活菌數(shù)達1
3、.4×109CFU/g。液體馴化的方法可以被廣泛應(yīng)用。
最后進行復合菌株的篩選,對單菌篩選出的優(yōu)良菌株進行組合實驗,分別測定各組合的總活菌數(shù)、乳酸菌單菌活菌數(shù)、pH值、乳酸度、干物質(zhì)回收率、干物質(zhì)體外消化率和粗蛋白體外消化率,選出優(yōu)良菌種組合。結(jié)果表明:優(yōu)良的菌種組合是1-3+J2,其總活菌數(shù)為6.05×108CFU/g,乳酸菌單菌活菌數(shù)為3.30×108CFU/g,pH值為5.21±0.01,乳酸度為1.01%±0.09,干
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