禽白血病p27陽性及臨床血管瘤型病雞的病毒分離與鑒定.pdf

1、禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)和禽肉瘤病毒(avian sarcoma virus,ASV)引起的禽類的各種良性和惡性腫瘤的統(tǒng)稱。近年來,我國各省均有ALV感染雞的報道,而且出現(xiàn)新的病變型-血管瘤型禽白血病的病例,特別是皮膚血管瘤的發(fā)生率很高,給我國的養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經濟損失。
　　本研究收集蛋清或泄殖腔拭子經 ALV p27抗原 ELISA檢測

2、為陽性的33只雞,分別采集其全血、血清、血漿、泄殖腔拭子、心、肝、脾、肺、腎、胰、腺胃、卵巢(或睪丸)、輸卵管、胸腺、骨髓和皮膚瘤16種不同的材料。首先對組織病料直接進行PCR的檢測;然后將處理好的全部材料接種于DF-1細胞,連傳兩代;再分別用ELISA和PCR兩種方法對F1代和F2代的細胞培養(yǎng)物進行檢測,目的在于對不同檢測方法的結果進行比較,以篩選出臨床上最適合分離ALV的材料。利用上述實驗驗證的方法,對臨床上表現(xiàn)為明顯血管瘤癥狀的1

3、6只雞進行病毒的分離與鑒定,并對獲得的ALV-J分離株進行env基因序列的測定和分析。
　　研究結果表明:1、本研究所選取的16種材料中,除胰臟外,其他15種材料均可分離得到 ALV,表明上述組織中均可能存在病毒;2、對蛋清或泄殖腔拭子的ELISA、病料直接PCR和病毒分離三種檢測方法中,以病毒分離的結果較為可靠,且以F2代細胞培養(yǎng)物的檢測結果最為可靠;3、對于活雞,血清是分離ALV的最佳材料,其次為血漿;對于死雞,腺胃是分離AL

4、V的最佳材料,其次為腎臟、心臟和卵巢;4、廣西地方品種雞—三黃雞、靈山黑雞和皇須雞均可發(fā)生血管瘤,且以三黃雞所占的比例最高(87.5％);5、臨床上表現(xiàn)出有明顯血管癥狀的雞只中有93.75%(15/16)能分離到ALV-J,有6.25%(1/16)分離到A和J兩個亞群。證實了A和J亞群ALV均能引起血管瘤,但臨床上以J亞群ALV感染為主,且首次發(fā)現(xiàn)少部分血管瘤的病雞存在A和J亞群ALV的混合感染;6、廣西5個來源于血管瘤病雞的ALV-J