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1、分類號S852.3UDC11.220學(xué)校代碼10129學(xué)號2010201052亞急性瘤胃酸中毒對瘤胃、瓣胃上皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響EffectsofSubacuteRuminalAcidosisonProliferationApoptosisofRumenOmasumEpithelialCell申請人:鄔宇航學(xué)科門類:農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)指導(dǎo)教師:劉大程副教授胡紅蓮研究員論文提交日期:二〇一三年六月摘要本
2、研究選取8只體況良好關(guān)中奶山羊做為試驗動物。按體重相近原則隨機(jī)分為三組:對照組(n=2)、亞急性瘤胃酸中毒(Subacuteruminalacidosis,SARA)組(n=3)和恢復(fù)組(n=3)。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧(NFCNDF=1.02),SARA組和恢復(fù)組通過飼喂非纖維性碳水化合物與中性洗滌纖維比(NFCNDF)為1.02(Ⅰ期)、1.24(Ⅱ期)、1.63(Ⅲ期)、2.58(Ⅳ期)的4種日糧誘導(dǎo)奶山羊發(fā)生SARA,恢復(fù)組試驗動物
3、待SARA誘導(dǎo)成功后自由采食青干草4周。每期試驗期結(jié)束進(jìn)行屠宰,取瘤胃、瓣胃上皮組織。(1)通過飼喂日糧不同NFCNDF比誘導(dǎo)試驗動物發(fā)生SARA,測定瘤胃pH值、揮發(fā)性脂肪酸、乳酸及干物質(zhì)采食量(Drymatterintake,DMI)變化來評價SARA模型的建立。結(jié)果表明,當(dāng)日糧NFCNDF比達(dá)2.58時,瘤胃pH值在5.5~5.2之間持續(xù)時間長達(dá)7.58hd,奶山羊發(fā)生SARA,瘤胃總的揮發(fā)性脂肪酸和丁酸濃度顯著增加(P0.05)
4、,乙酸濃度升高(P0.05)。(2)通過HE染色、顯微鏡、透射電鏡等技術(shù)對瘤胃、瓣胃黏膜進(jìn)行觀察,來研究SARA對瘤胃、瓣胃黏膜上皮形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果顯示,瘤胃乳頭高度、寬度及角質(zhì)層厚度均以SARA組最低,瓣胃角質(zhì)層和粘膜肌層厚度也均以SARA組最低。透射電鏡觀察結(jié)果顯示:SARA組與對照組及恢復(fù)組相比,上皮細(xì)胞微絨毛排列不整齊,線粒體腫脹、核固縮、染色質(zhì)邊集化,有較多的凋亡小體形成。(3)通過測定瘤胃、瓣胃上皮蛋白質(zhì)、DNA、RNA
5、、細(xì)胞增殖核抗原(ProliferatingCellNuclearAntigen,PCNA)的表達(dá)及細(xì)胞凋亡指數(shù)來研究SARA對瘤胃、瓣胃上皮生長、增殖與凋亡的影響。結(jié)果顯示,SARA明顯降低了瘤胃上皮蛋白質(zhì)、DNA及RNA含量,對瓣胃上皮的上述指標(biāo)均未產(chǎn)生明顯影響;SARA使瘤胃和瓣胃上皮細(xì)胞PCNA指數(shù)顯著降低并對上皮細(xì)胞的增殖表現(xiàn)抑制作用;SARA使瘤胃和瓣胃上皮細(xì)胞的凋亡指數(shù)顯著增高并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。(4)通過測定瘤胃、瓣胃上皮A
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