γ射線照射對小鼠腸道黏膜上皮細胞增殖的影響.pdf

1、目的：觀察不同劑量γ射線照射后小鼠空腸、回腸和結腸的形態(tài)學變化，腸粘膜上皮內(nèi)BrdU、Ki67免疫反應陽性增殖細胞的分布和數(shù)量變化的規(guī)律，腸絨毛及腸腺β-catenin蛋白表達量的變化，以了解γ射線照射后腸道的損傷程度及腸粘膜上皮細胞系的增殖狀態(tài)，從而探討射線照射對腸道上皮增殖細胞的影響，腸道上皮增殖細胞在腸黏膜損傷及修復的作用及可能機制，為進一步研究放射性腸道損傷提供實驗依據(jù)。
　　 方法：雄性C57BL/6小鼠72只，隨機分

2、為正常對照組、4Gy、8Gy、15Gy照射組四組。以60Coγ射線全身一次性照射制作動物模型，各組分別在1天，3天，5天稱重并處死小鼠。各小鼠處死前2個小時腹腔注射BrdU(120mg/kg體重)。取空腸、回腸、結腸于4％多聚甲醛液中固定，石蠟包埋、切片。常規(guī)HE染色后觀察腸道組織病理學變化并測量空腸、回腸腸絨毛高度和腸腺深度；免疫組化法檢測腸道BrdU、Ki67陽性細胞及β-catenin表達，并通過圖像分析系統(tǒng)拍照后進行相關體視學分

3、析，測算各腸段粘膜上皮內(nèi)BrdU、Ki67陽性細胞的數(shù)密度；腸絨毛及腸腺β-catenin蛋白的平均光密度。用統(tǒng)計軟件SPSS17.0比較各組參數(shù)的差異。
　　 結果：1.8Gy、15Gy中、高劑量γ射線照射可致小鼠精神不振，進食量減少，體重減輕；15 Gy照射后4天內(nèi)受照射小鼠全部死亡。
　　 2.不同劑量照射后小鼠腸黏膜組織均出現(xiàn)不同程度的損傷。損傷程度可隨劑量增加而加重，其中15Gy照射組3天損傷最為嚴重，4Gy、

4、8Gy第3天腸道損傷明顯，至第5天損傷有所恢復?；啬c段損傷比其他腸段嚴重。形態(tài)測量學顯示，受γ射線照射后，絨毛變矮，腸腺變淺。
　　 3.正常情況下，BrdU陽性細胞的數(shù)密度回腸>空腸>結腸；受γ射線照射后，各腸段BrdU陽性細胞的數(shù)密度隨照射劑量增加而降低，在照射后的第1天，低劑量照射便可見明顯降低，各劑量組各部位(除結腸4Gy組外)均明顯低于正常對照組(均P<0.01)；隨照射后時間延長，4Gy組和8Gy組各部位BrdU陽性

5、細胞的數(shù)密度逐漸回升，5天時4Gy組恢復至接近正常水平，但15Gy組隨時間延長而顯著降低。
　　 4.正常情況下，Ki67陽性細胞數(shù)密度絨毛>腸腺，回腸絨毛>空腸絨毛，空腸腸腺>結腸腸腺>回腸腸腺；受γ射線照射后，各腸段絨毛和/或腸腺Ki67陽性細胞的數(shù)密度隨照射劑量增加而降低，對腸腺的影響程度高于對絨毛的影響程度；照射后1天的數(shù)據(jù)比較，低劑量照射Ki67陽性細胞的數(shù)密度便明顯降低，各劑量組各部位(除回腸腸腺外)均明顯低于正常對

6、照組(均P<0.01)；隨照射后時間延長，4Gy組和8Gy組各部位Ki67陽性細胞的數(shù)密度逐漸回升，5天時4Gy組恢復至接近正常水平，但15Gy組隨時間延長而顯著降低。腸絨毛和腸腺Ki67陽性細胞數(shù)密度與絨毛高度和腸腺深度呈正相關。
　　 5.正常小鼠腸腺β-catenin可表達于上皮細胞胞膜、胞質(zhì)和細胞核，照射組僅位于胞膜、胞質(zhì)，細胞核沒有表達。正常情況下，β-catenin的平均光密度腸腺>絨毛，空腸絨毛>回腸絨毛，空腸腸腺

7、>回腸腸腺>結腸腸腺；各腸段絨毛和/或腸腺β-catenin平均光密度隨照射劑量增加而降低，對腸腺的影響程度高于對絨毛的影響程度，以照射后1天最明顯(均P<0.01)，隨照射后時間延長，4Gy組和8Gy組各部位β-catenin平均光密度逐漸回升，4Gy組5天恢復至接近正常水平，但15Gy組隨時間延長而顯著降低。
　　 結論：1.不同劑量γ射線照射可引起小鼠腸粘膜不同程度損傷，即劑量越大，損傷越嚴重。
　　 2.不同劑量