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文檔簡介
1、本試驗以原代培養(yǎng)鯉魚腸上皮細胞為研究模型,研究了大豆中主要抗營養(yǎng)因子之一——大豆凝集素(SBA)對鯉魚腸上皮細胞增殖分化及代謝的影響。通過細胞形態(tài)觀察、培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活力、谷丙轉氨酶(GPT)活力、谷草轉氨酶(GOT)活力等指標考察研究大豆凝集素對原代培養(yǎng)鯉魚腸上皮細胞結構完整性的影響;通過考察細胞MTTOD值、蛋白質含量、堿性磷酸酶(AKP)活力、Na+-K+-ATP酶活力等指標研究大豆凝集素對鯉魚腸上皮細胞增殖分化及凋
2、亡的影響;通過考察細胞中GPT活力、GOT活力、Na+-K+-ATP酶活力、細胞及培養(yǎng)液中蛋白質含量變化、培養(yǎng)液氨含量等指標探索大豆凝集素對原代培養(yǎng)鯉魚腸上皮細胞蛋白質代謝的影響。 試驗結果表明:SBA對原代培養(yǎng)鯉魚腸上皮細胞培養(yǎng)液中LDH活力、培養(yǎng)液GPT活力有極顯著影響(P<0.01),培養(yǎng)液LDH活力、培養(yǎng)液GPT活力分別與SBA含量呈極顯著的線性關系,y1=115.515+0.787x(R2=0.9140,P<0.01)
3、;y2=3.6807+0.0247x(R2=0.8720,P<0.01)(其中y1、y2分別為培養(yǎng)液中LDH活力和GPT活力,x為培養(yǎng)液中SBA含量),但對培養(yǎng)液GOT活力影響不顯著(P>0.05)。培養(yǎng)液中LDH活力分別與SBA含量、細胞GPT活力、培養(yǎng)液GPT活力呈極顯著的正相關(r1=+0.9560,P<0.01;r2=+0.9690,P<0.01;r3=+0.9260,P<0.01)。同時SBA顯著(P<0.05)或者極顯著(P
4、<0.01)增加細胞MTTOD值、蛋白質含量/孔;極顯著降低細胞AKP活力、Na+-K+-ATP酶活力(P<0.01);細胞MTTOD值與SBA含量呈極顯著正相關(r=+0.9550,P<0.01),Na+-K+-ATP酶活力/MTTOD與AKP活力/MTTOD值存在極顯著正相關(r=+0.9520,P<0.01)。SBA顯著或極顯著影響細胞蛋白質的沉積率、細胞GPT活力、細胞GOT活力及培養(yǎng)液中氨含量(P<0.05或P<0.01),細
5、胞GPT活力分別與SBA含量、培養(yǎng)液中氨含量呈正相關(r1=+0.9230,P<0.01,r2=+0.7470,P=0.0880),并呈極顯著或顯著線性關系(y1=14.9238+0.2001xR2=0.8520,P<0.01;y2=1089.414+0.686xR2=0.8260,P<0.05;其中y1、y2分別為細胞GPT活力、培養(yǎng)液中氨含量,x為培養(yǎng)液中SBA含量)。 綜合本試驗結果表明:在本試驗條件下,SBA破壞了鯉魚腸
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