

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1、分類號(hào)——UDC廈門(mén)大學(xué)博士后研究工作報(bào)告密級(jí)編號(hào)——日本囊對(duì)蝦凝集素的分離及其功能研究楊海杰合作導(dǎo)師:徐洵教授李少菁教授工作完成時(shí)間:2003年1月2005年9月報(bào)告提交時(shí)間:2005年12月廈門(mén)大學(xué)海洋與環(huán)境學(xué)院2005年12月AbstractAbstractCrustaceansassumeaparticulareconomicimportanceasafoodsourceandtheiruseinaquaculture,espe
2、ciallypenaeidshrimps,iscurrentlyexpandingTheSHCCeSSofshrimpcultivationis,howeverseriouslyendangeredbydiseasesLectinshavebeenregardedasanimportantroleinnon—selfrecognizationandpathogenclearanceininvertebrateimmunityThisdi
3、ssertationaims砒isolatingandcharacterizingthelectinsinshrimpinordertohelpthepreventionoftheshrimpdiseasesByusingaffinitychromatographywithfetuinSepharose,anaturallectin(nominatedPjLec)wasisolatedfromthehemolymphoftheshrim
4、pMarsupenaeusjaponicusSDSPAGEshowedthatthepurifiedPjLecproteinconsistedof37kDasubunitsThenativePjLecbehavedasa452kDaproteiningelfiltrationchromatographywithSuperdex200ThosedatastronglysuggestthatPjLecisbuiltupby12subunit
5、sofsimilarmolecularweightPjLeccouldagglutinateallthemammalianerythrocytestested,andthehemagglutinationiscalciumindependentTheagglutinationactivitywasstablebetweenpH6andpH8,andwastemperature—dependentThehemagglutinationof
6、PjLecproteinwasinhibitedbyManNAc,Neu5Aandlipopolysaccharide(LPS)Bovinesubmaxillarymuein(BSM),whichcontainsmainlyNeu5A,isthemostpotentinhibitorofPjLec謝tllaMICofO0006medmLFurthermore,PjLechasabroadagglutinationactivityonGr
7、amnegativeandpositivebacteriaand4of5strainsofpathogeneticbacteriaofshrimp(Vibrioparahaemolyticus,Aeromomashydrophilic,VibrioalginolyticusandMicrococcuslysodeikticus)couldbeagglutinatedbyPjLeeItsuggestsPjLecmightplayanimp
8、ortantroleindefenseagainstbacterialinfectioninPenaeusjaponicusInpreviousstudies,weisolatedanovelCtypelikelectin(nominatedPjLec2)fromtheSSHlibraryofhepatopancreasinMarsupenaeusjaponicusTheexpressionlevelofPjLec2mRNAinviru
9、sresistantshrimpsisobviouslyhigherthanthatinnormalshrimpsInthisstudylectinPjLec2wasexpressedinEcoliandpartialfimctionofPjLec2wasanalyzedItcouldbehighlyexpressedinEcoliwhenfusedwithGSTHoweverhemagglutinationassayshowedtha
10、tpurifiedPjLee2waslackofhemagglutinatingactivitytoall7testedmammalRBCsincludingmouse,miceandrabbit,Inaddition,9721eccanagglutinatetwoGramnegativebacteriaAeromomashydrophilicandHbrioalginolyticusbothofwhicharemayorpathoge
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