抗致病性弧菌及希瓦氏菌有效中藥與方劑的篩選、抗菌機理研究.pdf

1、為探討中藥方劑水煎液對致病性弧菌及希瓦氏菌的抗菌活性、抗菌機理，為其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供研究基礎(chǔ)。本研究采用平皿打孔法測定17種中藥對副溶血性弧菌2株、哈氏弧菌1株、創(chuàng)傷弧菌1株、腐敗希瓦氏菌1株、鮑魚希瓦氏菌1株、海藻希瓦氏菌2株共8株菌的體外抑菌效果；采用平皿打孔法和試管兩倍稀釋法測定11種中藥的相互作用關(guān)系及三個方劑的體外抑菌效果；選用0.35 g左右的健康方斑東風(fēng)螺100個，隨機分為5組，每組20個，第Ⅰ組為對照組，不添加

2、方劑1，Ⅱ～Ⅴ為試驗組，分別添加一定量的方劑1，使方劑1在水體中的濃度達(dá)到1/160 g/mL、1/320 g/mL、1/640 g/mL、1/1280 g/mL，分別在給藥前及給藥1，3，5，7d共取樣5次，測定水中和方斑東風(fēng)螺內(nèi)臟團內(nèi)菌落總數(shù)和菌群構(gòu)成；通過測定方劑1作用一定時間后副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌胞外堿性磷酸酶含量和電導(dǎo)率的變化探討中藥方劑的作用機理。結(jié)果顯示：
　　1.17種中草藥的水煎液對8株

3、菌的抑制作用不同，其中五倍子、烏梅、蘇木、猴耳環(huán)效果最好，抑菌圈直徑介于14.44 mm～29.00 mm；石韋、鴨膽子、益智仁、郁金、板藍(lán)根、貫眾除石韋對一株海藻希瓦氏菌有抑菌作用外其余均未見抑菌作用。
　　2.11種中草藥的聯(lián)合藥敏試驗中除對藥黃芩和烏梅、桉葉和五倍子、秦皮與地榆、烏梅與地榆、蘇木與大黃、蘇木與石榴皮、桉葉與黃芩、大黃與黃芩、五倍子與秦皮對供試的8株菌中某些供試菌表現(xiàn)為協(xié)同外，其余對藥對供試的8株菌相互作用都表

4、現(xiàn)為相加。
　　3.三個方劑對副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌抑菌圈直徑介于12.32 mm～18.54 mm，方劑1的抑菌效果最好，最小抑菌濃度介于1/640～1/160 g/mL，最小殺菌濃度介于1/320～1/160 g/mL。
　　4.水中添加不同劑量的方劑1，對水中菌落總數(shù)和菌群構(gòu)成有一定的作用，其中添加劑量組為1/320 g/mL對水中菌落總數(shù)和菌群構(gòu)成的影響較大，水中菌落總數(shù)減少2.80×106個

5、/mL，且弧菌數(shù)量減少40％。
　　5.水中添加不同劑量的方劑1，對生活在水中方斑東風(fēng)螺內(nèi)臟團內(nèi)菌落總數(shù)和菌群構(gòu)成有一定作用，其中添加劑量組為1/640 g/mL對方斑東風(fēng)螺內(nèi)臟團內(nèi)菌落總數(shù)和菌群構(gòu)成的影響較大，方斑東風(fēng)螺內(nèi)臟團內(nèi)菌落總數(shù)減少2.85×106個/mL，且弧菌數(shù)量減少50%。
　　6.濃度分別為1/320 g/mL，1/640 g/mL，1/640 g/mL和1/160 g/mL的方劑1對副溶血性弧菌、哈氏弧菌

6、、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌作用一段時間后，相應(yīng)菌液的胞外堿性磷酸酶含量隨處理時間的延長升高，而對照組變化很小。
　　7.濃度分別為1/320 g/mL，1/640 g/mL，1/640 g/mL和1/160 g/mL的方劑1對副溶血性弧菌、哈氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌和鮑魚希瓦氏菌作用一段時間后，相應(yīng)菌液電導(dǎo)率增加，而對照組變化很小。
　　可見，17種中草藥對8株菌的抑菌作用能力不一樣，五倍子、烏梅、蘇木、猴耳環(huán)優(yōu)于其他中草藥；11種中